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滑膜細(xì)胞的原代提取
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我剛接觸細(xì)胞,要做大鼠膝關(guān)節(jié)的滑模細(xì)胞,看了幾篇文獻(xiàn),想問下做過(guò)的大俠,消化時(shí)間一般多少的,今天做了,用二型膠原酶加DMED共4ML消化了2.5H,然后在用胰蛋白酶加EDTA消化了半小時(shí),最后發(fā)現(xiàn)沒有細(xì)胞,請(qǐng)問是取出的組織比較少(一只大鼠)還是消化時(shí)間過(guò)度,細(xì)胞都裂解了 急求相關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟 |
| 我在養(yǎng)人滑膜的 估計(jì)養(yǎng)的方法一樣 我是先用1立方左右的組織干貼在培養(yǎng)瓶底 3小時(shí)后加入20%血清的培養(yǎng)基(切記不能讓組織塊動(dòng)了)培養(yǎng) 兩天左右就可以看到有細(xì)胞爬出來(lái)了 。還有一種 就是剪組織勻漿 不用消化 讓進(jìn)去養(yǎng) 一樣能養(yǎng)出來(lái) |
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