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shuiguoshala銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
【求助】+ 多糖甲基化
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甲基化方法： 經(jīng)P205室溫真空干燥的多糖5mg，置于10ml反應(yīng)瓶中，注入DMSO，充入氮?dú)�，磁力攪拌下溶�?0min，使樣品充分溶解，加入20mg充分干燥的NaOH粉末，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌至大部分NaOH溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)，避光，冰浴的條件下，緩慢加入0.5mL碘甲烷，室溫避光振蕩反應(yīng)30min后，加入2ml水反應(yīng)終止。將反應(yīng)液減壓旋蒸一定時(shí)間后，轉(zhuǎn)入透析袋中自來水對(duì)水流透析過夜，透析液冷凍干燥，重復(fù)操作3次。 取少量樣品兩份，一份經(jīng)105℃干燥，另外一份經(jīng)P205室溫真空干燥后進(jìn)行紅外光譜檢測(cè)，若3600-3200cm-1處的O-H寬峰消失，說明甲基化完全，否則需重復(fù)甲基化。 我做了6次還沒有完全甲基化，而且不同干燥條件下的紅外圖譜明顯不同，不知道實(shí)驗(yàn)方法哪里還需要改進(jìn)的，甲基化高手啊，請(qǐng)幫幫我吧！ |
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