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mildstory鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
乙二醛處理的細(xì)胞，RNA總也提不好，怎么辦��？
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各位好！ 我最近用乙二醛處理貼壁細(xì)胞后，用trizol提總RNA,260/280 總是在1.5 左右徘徊（而未用乙二醛處理的細(xì)胞就沒這問題，比值在1.8以上），這樣質(zhì)量的RNA 做了逆轉(zhuǎn)錄，效率就很低。請問各位，這是什么原因？我改怎么辦才能提高質(zhì)量？ 剛開始，實(shí)驗(yàn)室的老師們認(rèn)為是細(xì)胞沒有裂解好(在顯微鏡下看，的確細(xì)胞都沒 被trizol裂解，形態(tài)完好)，我用用加trizol后液氮和37度反復(fù)凍融四次，結(jié)果比值原來還低。是不是乙二醛使得蛋白和RNA發(fā)生了交聯(lián)? 多謝，各位同道��！ |
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