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gloryping鐵桿木蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
HRP標(biāo)記DNA 已有1人參與
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| 有沒(méi)有人做過(guò)將HRP標(biāo)記到DNA上的實(shí)驗(yàn)��？有沒(méi)有具體步驟��？ |
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amisking(金幣+3, BioEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-08-25 19:21:03
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
amisking(金幣+3, BioEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-08-25 19:21:03
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標(biāo)記之后是想做雜交么？凡是涉及到雜交的話，把蛋白標(biāo)記到HRP的過(guò)碘酸鈉法恐怕不行，因?yàn)閱捂淒NA上的-NH2不能用來(lái)標(biāo)記，這很容易想，因?yàn)檫@樣標(biāo)記容易使整條DNA趴在HRP上，而且-NH2被用掉了，就不能在互補(bǔ)鏈的配對(duì)中形成氫鍵了。 個(gè)人覺(jué)得比較好的做法是在DNA和HRP之間搭個(gè)“橋”，就是在引物或者探針的末端做修飾，比如可以加個(gè)生物素，同時(shí)把鏈親合素標(biāo)記到HRP上，然后通過(guò)生物素-鏈親和素把引物和HRP偶聯(lián)（換成FITC和FITC的抗體之類的也行）；或者在引物或探針末端修飾-SH，再通過(guò)SMCC標(biāo)記到HRP的-NH2上，方法很多的�？茨愕膶�(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇最好方案吧。 |
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2樓2011-08-25 17:08:00
gloryping
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3樓2011-08-25 21:24:35
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4樓2011-08-25 22:18:59
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