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qingtingzhe銀蟲 (正式寫手)
步行者
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[求助]
求助高手：關(guān)于環(huán)羥化雙加氧酶的克隆和表達(dá)
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求助高手： 我在做關(guān)于多環(huán)芳烴降解機(jī)制的研究，芳香烴的降解第一步是羥基化，需要環(huán)羥化雙加氧酶。環(huán)羥化雙加氧酶有兩個(gè)亞基，對(duì)兩個(gè)亞基的克隆和表達(dá)的一直沒做出來。這兩個(gè)亞基有部分重疊，有文獻(xiàn)報(bào)道可以將兩個(gè)基因一起克隆和表達(dá)，他用的質(zhì)粒是pET-17b,宿主是大腸桿菌BL21，我們實(shí)驗(yàn)室沒有pET-17b，所以用的是pET-32a，宿主為大腸桿菌BL21，但表達(dá)時(shí)只有大亞基表達(dá)了，后面的小亞基沒表達(dá)。貌似是質(zhì)粒的原因，請教高手指點(diǎn)。 |
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