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lrj621031金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
POD測(cè)定時(shí)吸光度變化值怎么算的？
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在測(cè)定POD活性的時(shí)候，要求反應(yīng)時(shí)間內(nèi)吸光度的變化△A，不知道怎么求了。反應(yīng)時(shí)間為5min的話，那用五分鐘點(diǎn)吸光度減去最初的吸光度不就行了么，為什么還要每分鐘讀一次吸光度呢？難道就為了看它呈線性關(guān)系的？求指教啊， |
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junjiew7781
銅蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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- 專(zhuān)業(yè): 園藝作物采后生物學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
lrj621031(金幣+5): 3Q 2011-08-29 07:52:20
junwen6516(食品EPI+1): 鼓勵(lì) 2011-08-29 08:11:59
sweety: 回帖置頂 2011-12-30 09:33:45
junwen6516(食品EPI+1): 鼓勵(lì) 2011-08-29 08:11:59
sweety: 回帖置頂 2011-12-30 09:33:45
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要記錄反應(yīng)體系在470nm的吸光度值，然后制作OD470值隨時(shí)間變化曲線，根據(jù)曲線的初始線性部分計(jì)算沒(méi)分鐘吸光度變化值△OD470. △OD470=(OD470終-OD470始)/△t,也就是說(shuō)如果呈線性關(guān)系，你就可以用5分鐘OD值減除初始OD值再除以5分鐘，但是注意酶活性還要以比活性表示，也就是單位時(shí)間內(nèi)單位蛋白催化產(chǎn)生產(chǎn)物量或消耗底物量表示，你還要用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)出蛋白量，最后表示為U=△OD470/V*C, V為測(cè)定時(shí)吸取提取液體積，C為提取液蛋白濃度；當(dāng)然你也可以表示為單位重量組織單位時(shí)間內(nèi)改變吸光度值表示。具體你也可以參考曹健康等編寫(xiě)的《果蔬采后生理生化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》第101-103頁(yè)。 |
2樓2011-08-29 00:06:40
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