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yangliguo007木蟲 (著名寫手)
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[求助]
單糖的PMP衍生化遇到問題，困擾許久，請(qǐng)各位大俠幫忙。謝謝�。∈指兄x！
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我現(xiàn)在做標(biāo)準(zhǔn)單糖的PMP衍生化，用HPLC檢測(cè)，用的是C18柱，對(duì)照品是葡萄糖、甘露糖、半乳糖，鼠李糖，阿拉伯糖和木糖，出現(xiàn)的問題是：各單糖對(duì)照品在同一個(gè)時(shí)間出峰，混和各單糖標(biāo)品后也只出現(xiàn)一個(gè)峰，到底是怎么回事呢？？？流動(dòng)相比例我也嘗試很多種，可還是出現(xiàn)同樣的問題，實(shí)驗(yàn)進(jìn)行不下去，頭疼啊�。。�！具體的實(shí)驗(yàn)方法 單糖混合液的制備： 配制濃度為0.36μg單糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液，取其100μL與0.6mol/LNaOH溶液100μL混合，再加入0.5mol/LPMP甲醇溶液200μL混勻。70℃水浴反應(yīng)100min,冷卻至室溫10min后，加0.3mol/LHCl溶液200μL中和，加水900μL，混勻，加入氯仿1.5m萃取，混勻，靜置，棄氯仿相，依法萃取3次，水相經(jīng)0.45μm濾膜過濾后進(jìn)樣。 色譜條件： 進(jìn)樣量20μL，流動(dòng)相為17%的乙腈-磷酸鹽緩沖液，流速1mL/min |
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dazhu821
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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2樓2011-08-30 00:34:10
宋大炮
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3樓2011-08-31 09:21:46
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您好，我最近也在做這個(gè)實(shí)驗(yàn)，也是遇到了同樣的問題，我想問下您當(dāng)時(shí)是怎樣解決的啊？我已經(jīng)被困了快3個(gè)月了…淚奔啊。雖然不知道您能不能回答我，還是抱著僥幸的心態(tài)試試吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-05-16 10:37:53
jianlongli
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- 專業(yè): 生物信息學(xué)
5樓2017-12-19 10:05:08
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