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1289622木蟲 (正式寫手)
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[求助]
血漿蛋白沉淀問題
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血樣品處理過程，蛋白沉淀與藥物提取如何操作，是先沉淀蛋白還是提取藥物?若用乙腈沉淀蛋白，乙腈-乙酸乙酯（30:70）提取藥物該怎樣操作？乙腈-乙酸乙酯（30:70）會(huì)溶解蛋白吧？！ 乙腈-乙酸乙酯（30:70）提取藥物離心后，上清液要全部取完嗎，比如離心后上清液6ml，只取5ml，每次平行操作這樣可以嗎？ [ Last edited by 1289622 on 2011-9-1 at 17:25 ] |
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3樓2011-09-04 20:33:49
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2樓2011-09-02 22:53:28
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【答案】應(yīng)助回帖
1289622(金幣+2, 博學(xué)EPI+1): 2011-09-05 17:52:47
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你好，我也不是什么大俠，都是同輩。蛋白沉淀就是把血漿（或者血清）里頭的蛋白沉淀下來，方法就是加有機(jī)溶劑使蛋白沉淀，“有些情況下”，上清液可以直接上液相（需過濾膜，當(dāng)然高速離心如一萬二可以不過膜，或者吸取上清液干燥復(fù)溶，復(fù)溶的目的1、萃取，2、增加濃度）。液液萃取就是渦旋離心，使一部分血液內(nèi)源性物質(zhì)不萃取，而目標(biāo)化合物可以萃取在有機(jī)相中，原理為有機(jī)相是蛋白質(zhì)變性沉淀，同時(shí)根據(jù)相似相容原理萃取目標(biāo)分析物，直接吸取萃取部分上樣或者復(fù)溶。記住，請(qǐng)回頭看，我打引號(hào)的有些情況下部分，對(duì)于一些物質(zhì)，直接用蛋白沉淀，內(nèi)源性雜志很多，導(dǎo)致“基質(zhì)效應(yīng)”太大，而單獨(dú)用液液萃取，可能回收率太低，所以在一些文章中，將液液萃取和蛋白沉淀兩者結(jié)合起來用。這個(gè)我想我說明白了，還不明白自己找一篇中文或者英文的相關(guān)文獻(xiàn)，看樣品制備部分就能夠理解我所說的意思了。 對(duì)于你第二個(gè)問題，你看過藥時(shí)曲線（血藥濃度-時(shí)間），只要保證有先上升后下降形狀就行，當(dāng)然由于有些藥物分布太快，只能看到下降的部分，那你就盡量早取血，不必拘泥于2min或者5min之類，只要能夠保證有上升和下降就好了，當(dāng)然只有下降部分，也可以。希望你能夠明白了！ |
4樓2011-09-04 21:56:33
1289622
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5樓2011-09-05 15:25:19
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