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friya0910新蟲(chóng) (正式寫手)
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[求助]
IPTG誘導(dǎo)
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| 有沒(méi)有不加IPTG誘導(dǎo)，也能表達(dá)目的蛋白的情況存在�。课业臎](méi)加IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng)5h的菌好像也表達(dá)我的目的蛋白了，怎么回事��？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
friya0910(金幣+1): 2011-09-01 19:31:00
dhd997(金幣+3): good 2011-09-02 07:00:33
friya0910(金幣+1): 2011-09-01 19:31:00
dhd997(金幣+3): good 2011-09-02 07:00:33
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1、在沒(méi)有IPTG誘導(dǎo)劑存在的情況下，細(xì)菌本身當(dāng)然還是會(huì)表達(dá)自身蛋白的，但是量比較低； 2、IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì)，在它的誘導(dǎo)下乳糖被催化形成半乳糖，使lac操縱子處于激活狀態(tài)，從而大量的轉(zhuǎn)錄表達(dá)目的基因； 3、IPTG對(duì)細(xì)菌有一定的毒害作用，一般使用濃度為1mM/ml. |
4樓2011-09-01 19:28:13
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3樓2011-09-01 19:20:46
friya0910
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http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=3538745 上面有我跑的全菌蛋白的圖，麻煩您幫我看看，這圖能說(shuō)明我的蛋白表達(dá)了嗎？這圖沒(méi)跑未加IPTG的菌培養(yǎng)5h的情況，我今天跑的上清和沉淀，發(fā)現(xiàn)未加IPTG的菌培養(yǎng)5h后上清中都有我的目的蛋白，于是我就困惑了……等脫完色把圖傳上來(lái)讓您幫我看看，成嗎？ |
5樓2011-09-01 19:30:36
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6樓2011-09-01 19:42:54
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