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ppt1210至尊木蟲 (著名寫手)
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[求助]
跑2D電泳遇到問題,求解
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昨天在配SDS緩沖液的時候遇到了問題,一直不溶,在大家?guī)椭陆鉀Q了,今天又遇到了新問題。還是與緩沖液有關(guān),在跑2D第二相的時候,跑到1/3左右的時候就跑不動了,biorad的電泳儀顯示E01,剛開始以為是儀器問題,重開,然后看了在220V電壓下的下電流只有20-30mA,過一會兒就又不行了。換了儀器還是一樣,顯示E01。于是想到可能是新配的SDS緩沖液的問題,趕緊換上之前師姐配的那些緩沖液,就能正常運行了。唉,中間間斷了近1個小時,不知道sample會不會受很大影響。。 下面是我配緩沖液的比例以及所用試劑,為何配的SDS electrophoresis running buffer總有沉淀? 配置跑SDS-PAGE用的電泳液時候,先配10倍的,用時在稀釋成1倍的,具體配方如下: 250mM Tris base, 1.92 M glycine, 1% SDS, 加水到1L, 具體稱了 30.3 g Tris base,144.1g Glycine, 10 g SDS, Tris base: sigma公司, 純度>99.9% Glycine: 1L公司,純度>99% SDS: USB公司, (最有可能出問題的是這個,這是02年的一瓶了,從隔壁借的,之前我們自己的用完了,前面兩個藥品都是新的。) 求大家?guī)兔Ψ治鱿略颉?br /> 謝謝。 謝謝 |

木蟲 (著名寫手)
小笨蟲蟲

至尊木蟲 (著名寫手)

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