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0代凍干粉如何接種至1代
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| 新買回來的0代凍干粉如何接種到斜面培養(yǎng)基上?直接用培養(yǎng)液溶解凍干粉,然后取少量菌液接種到斜面上可以嗎? |
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A)把凍干菌種管、滅菌毛細(xì)滴管(1ml)、雙碟、鑷子、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(或其它適宜培養(yǎng)基)數(shù)支,移入接種室或超凈工作臺。 B)將凍干菌種管外壁用碘酒擦洗消毒,稍干,用75%乙醇棉擦凈,放在滅菌雙碟內(nèi),待干。點(diǎn)燃酒精燈,將標(biāo)準(zhǔn)菌種管的封口一端在火焰上,燒灼紅熱,用滅菌毛細(xì)滴管吸取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(或其它適宜的培養(yǎng)基),滴在灼熱的菌種管封口一端,使驟冷而炸裂。 C)取滅菌鑷子,在火焰旁,將炸裂的管口打開,放入滅菌雙碟內(nèi),另取1支滅菌毛細(xì)滴管,在火焰旁吸取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(或其它適宜的培養(yǎng)基)少許,加至菌種管底部,將凍干菌塊攪動促使溶解,隨即吸出管內(nèi)菌液,接種至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(或其它適宜的培養(yǎng)基)內(nèi),并根據(jù)不同菌種類型而將其培養(yǎng)于相宜的溫度下24~72小時(shí)(細(xì)菌需要 24~48 的培養(yǎng)物,酵母菌需要72小時(shí)的培養(yǎng)物,形成孢子的微生物則宜保藏孢子,放線菌和絲狀真菌則應(yīng)培養(yǎng)7~10 天)。最后將毛細(xì)滴管及菌種管經(jīng)高溫滅菌(121℃,45分鐘)。 D)取出培養(yǎng)物,仔細(xì)觀察液體培養(yǎng)基是否渾濁,渾濁說明菌種復(fù)活生長,若不渾濁,在將其作為無活菌生長的培養(yǎng)物丟棄以前,細(xì)菌應(yīng)至少培養(yǎng)1周以上,真菌和酵母菌至少應(yīng)培養(yǎng)2周以上,并在丟棄之前應(yīng)高溫滅活處理(121℃,45分鐘)。 |
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