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linda1838新蟲 (初入文壇)
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[求助]
聚丙烯酰胺凝膠電泳
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現(xiàn)在在做聚丙烯酰胺電泳，膠濃度為15%，電壓100v，電流30mA左右。運行后15min，loadingbuffer都不動，這是怎么回事？現(xiàn)在實驗都不能進(jìn)行了。 我確定我的loadingbuffer質(zhì)量是沒問題的。我覺得我可能是細(xì)節(jié)上出了問題，求高手指點！ |
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dhd997(金幣+5): good 2011-09-12 08:35:41
dhd997(金幣+5): good 2011-09-12 08:35:41
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是不是膠濃度有問題。濃縮膠濃度一般為3%-5%，分離膠濃度根據(jù)待分離樣品的情況選擇適當(dāng)?shù)姆蛛x膠濃度，通常使用的15％的聚丙烯酰胺凝膠的分離范圍是104～105，即分子量小于104的蛋白質(zhì)可以不受孔徑的阻礙而通過凝膠，而分子量大于105的蛋白質(zhì)則難以通過凝膠孔徑，這兩種情況的蛋白質(zhì)都不能得到分離。所以如果要分離較大的蛋白質(zhì)，需要使用低濃度如10％或7.5%的凝膠（孔徑較大）；而對于分離較小的蛋白質(zhì)，使用的較高濃度凝膠（孔徑較�。┛梢缘玫礁玫姆蛛x效果。 |
2樓2011-09-05 09:51:25
zlu520
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