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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 【轉】革蘭氏陽性細菌的轉化
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hopebiolqdhb金蟲 (著名寫手)
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[交流]
【轉】革蘭氏陽性細菌的轉化 已有1人參與
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一、革蘭氏陽性細菌，轉化過程的幾個階段： 1.細菌感受態(tài)的形成 由于分泌一種稱為感受態(tài)因子的小蛋白而導致細菌感受態(tài)的形成。 2.轉化因子的吸收 雙鏈DNA片段與感受態(tài)受體菌的細胞表面特定位點結合，并激活臨近的核酸酶。DNA雙鏈中的一條單鏈逐步降解，同時另一條單鏈逐步進入細胞。 3.整合復合物前體的形成 一種特殊蛋白與單鏈DNA結合，有效保護單鏈DNA免遭核酸酶的降解，并將其引導至受體菌染色體DNA處。 4.單鏈DNA轉化因子的整合 轉化DNA單鏈可以通過同源重組，置換受體細胞染色體DNA的同源區(qū)，形成異源雜合雙鏈DNA結構。 5.轉化子的形成 受體菌染色體組進行復制，雜合區(qū)段亦半保留復制，當細胞分裂后，此染色體發(fā)生分離，于是新形成一個轉化子。 二、影響轉化的因素 1.DNA能否進入細胞； 2.DNA進入細胞后的穩(wěn)定性； 3.質粒DNA的大小，大質粒的轉化效率低于小質粒，到目前，大于30kb的質粒，轉化效率仍很低； 4.DNA的濃度、純度和形狀； 5.誘導感受態(tài)細菌所用的離子的種類和濃度； 6.熱休克時間的長短及平板培養(yǎng)條件等。 |
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terryxiaolei
木蟲 (正式寫手)
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不錯。 2樓2011-09-06 15:16:33
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