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jimmychen金蟲 (小有名氣)
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[求助]
重金求助關(guān)于離子交換樹脂層析柱分離中性多糖的操作，先行謝謝各位
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小弟最近在做一個(gè)活性物質(zhì)分離純化，發(fā)酵一種真菌，上清液中含有活性物質(zhì)，是一中性多糖，想通過離子交換樹脂法來進(jìn)一步除雜，因第一次研究，望有經(jīng)驗(yàn)的師兄師姐們幫幫忙。。。謝謝非常 查閱的關(guān)于離子交換樹脂的文獻(xiàn)，知道硼酸與多糖產(chǎn)生反應(yīng)形成有陰離子的復(fù)合物，因而用陰離子交換樹脂，現(xiàn)在小弟有以下幾個(gè)問題： 1.陰離子交換樹脂我應(yīng)該選哪種類型，應(yīng)該選什么樣的柱子，樹脂量一般是多少？ 2.進(jìn)樣前，樣品怎樣處理，進(jìn)樣時(shí)應(yīng)保持怎樣的濃度，也即是稀釋到幾十毫升還是保持濃縮后的幾毫升進(jìn)樣？ 3.硼酸與中性多糖反應(yīng)是在樣品進(jìn)樣前放在一起處理，還是用硼酸處理柱子中的陰離子交換樹脂？ 4.我查過一篇文獻(xiàn)，講的是進(jìn)過樣后用分別用水，0.05 M硼酸溶液、0.08 M硼酸溶液和0.5 M NaOH溶液洗脫。。。。。要是用硼酸處理柱子樹脂，應(yīng)該用多少濃度的硼酸啊。。。NaOH溶液是起柱子再生作用嗎？ 5.帶有硼酸和中性多糖的流分怎么進(jìn)行檢測(cè)和分離開啊 問題比較多， 先在此謝謝 |
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5樓2011-09-10 23:10:49
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