【答案】應助回帖

11樓2011-10-10 00:27:59

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laokuang1988

銅蟲 (小有名氣)

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zhang8826857(金幣+2): 鼓勵積極回帖交流^_^鼓勵新蟲 2011-10-16 10:13:13

我前幾天剛提了真菌的，是用手提的，加了石英砂，在漩渦震蕩儀上振蕩充分，提出來了。

12樓2011-10-15 18:40:21

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maidmocha

鐵桿木蟲 (小有名氣)

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★
zhang8826857(金幣+1): 鼓勵積極回帖交流^_^ 2011-10-16 10:13:21

建議使用CTAB & 液氮研磨法，得率和純度都不錯。注意一下低溫的保持。其他的方法都很成熟。
個人認為，DNA與RNA的提取完全不需要試劑盒什么的。

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13樓2011-10-15 23:39:00

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doublehelix

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zhang8826857(金幣+1): 鼓勵積極回帖 2011-10-16 15:03:21

真菌是挺難提的，我以前用氯化芐法，DNA完全可滿足分子生物學的需要

14樓2011-10-16 14:08:36

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匿名

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15樓2011-10-18 14:23:27

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julin1002

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我們在跑電泳時用的是TAE緩沖液，用EB染色

16樓2012-05-11 19:32:29

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暖暖ai

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引用回帖:

8樓: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-09-15 22:47:34
樓主極少上論壇，找一下我獲得EPI 的回帖吧，就全明白了，我在這里就不說方法了，我不想要重復的EPI。

我沒找到你說的那個貼，能不能給我發(fā)一下吖

[ 發(fā)自手機版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

17樓2014-07-21 08:39:08

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冼亮淀粉酶

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【答案】應助回帖

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silicare: 金幣+5, MicEPI+1, 應助指數(shù)+1, 的確是個問題 2014-07-21 17:50:31

引用回帖:

17樓: Originally posted by 暖暖ai at 2014-07-21 08:39:08
我沒找到你說的那個貼，能不能給我發(fā)一下吖
...

小木蟲有個很蠢的缺點，太久遠的搜索不顯示。

5）DNA抽提液的配置
表 2-5 DNA抽提液的配置
Table 2-5 The component of DNA distilling buffer
成分濃度
NaCl 200mmol/L
EDTA-Na2 4mmol/L
SDS 2%
Tris-HCl(pH=8.0) 100mmol/L

2.2.5.2.1真菌總DNA的提取
（1）接種菌株至液體培養(yǎng)基中，28℃，180rpm振蕩培養(yǎng)3天；
（2）用滅菌紗布過濾，并壓干菌體；
（3）將菌絲體倒入研缽（滅菌并預冷），迅速倒入液氮，研磨至粉末狀；
（4）將粉末移至1.5mL的EP管中，加入600µL真菌提取液；
（5）加等體積苯酚/氯仿，輕輕倒轉(zhuǎn)混合，10000rpm離心10min；
（6）取500µL上清液移入新的1.5mlLEP管，重復步驟（5）；
（7）取上清液，加入兩倍體積無水乙醇，-20℃放置30min；
（8）10000rpm 離心10min，沉淀物用75%乙醇洗2次后真空干燥；
（9）以20µL 1×TE 溶解沉淀物；
（10）電泳檢測總DNA的濃度。

圖片1.jpg

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暖暖ai

流星來時我許了個愿，愿我有吃有喝還有舒服的豬圈。討厭發(fā)帖前不搜索論壇重復發(fā)帖和僅把論壇當解決問題工具，久不看論壇一來就提問者，寧棄EPI和VIP也不回帖。

18樓2014-07-21 13:03:46

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暖暖ai

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引用回帖:

18樓: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-07-21 13:03:46
小木蟲有個很蠢的缺點，太久遠的搜索不顯示。

5）DNA抽提液的配置
表 2-5 DNA抽提液的配置
Table 2-5 The component of DNA distilling buffer
成分濃度
NaCl 200mmol/L
EDTA-Na2 4mmol/L
SDS 2%
Tris ...

謝謝你。有不懂的還會麻煩你的！