【答案】應(yīng)助回帖

11樓2011-09-20 22:41:52

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capsaicine

鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)

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西瓜: 通過(guò)改變上樣量來(lái)使條帶看起來(lái)亮度一樣，有造假嫌疑吧…… 2011-09-21 17:30:35

半定量首選準(zhǔn)確性就不是很高的，可能你每做一次實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)就是不一樣的
你可以用照膠的軟件去看一下內(nèi)參基因條帶的亮度，然后根據(jù)亮度去增加內(nèi)參基因的點(diǎn)用量，不知道你聽(tīng)明白沒(méi)有。

12樓2011-09-21 11:17:32

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lzh860801

金蟲(chóng) (正式寫手)

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★
西瓜(金幣+1): 歡迎交流 2011-09-21 17:31:00

把亮的樣品模板稀釋根據(jù)亮度來(lái)
半定量定內(nèi)參一般稀釋亮的比較好靠多加模板來(lái)增加暗帶的濃度比較難

13樓2011-09-21 16:44:05

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fearlessman

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★ ★
dhd997:編輯內(nèi)容 2011-09-22 08:09
dhd997(金幣+2): 鼓勵(lì)交流，不要在發(fā)廣告了，小心被封了 2011-09-22 08:09:49

先用圖片分析軟件測(cè)定對(duì)比下條帶亮度，再根據(jù)亮度調(diào)整模板量
希望能幫助你，好像PS也可以定量

[ Last edited by dhd997 on 2011-9-22 at 08:09 ]

14樓2011-09-21 21:06:30

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shuanyu0202

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首先問(wèn)一下，你定量是用的什么方法，什么機(jī)器，這個(gè)有時(shí)候定量是相當(dāng)不準(zhǔn)的，我們一般樣本量一樣的時(shí)候提取出來(lái)的RNA差不了多少，然后不同樣本的內(nèi)參區(qū)別也不大。

15樓2011-09-22 13:52:13

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西瓜

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引用回帖:

12樓: Originally posted by capsaicine at 2011-09-21 11:17:32:
半定量首選準(zhǔn)確性就不是很高的，可能你每做一次實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)就是不一樣的
你可以用照膠的軟件去看一下內(nèi)參基因條帶的亮度，然后根據(jù)亮度去增加內(nèi)參基因的點(diǎn)用量，不知道你聽(tīng)明白沒(méi)有。

我以為你說(shuō)的是跑電泳的上樣量……模板量的調(diào)整當(dāng)然ok……

16樓2011-09-22 16:08:28

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根據(jù)內(nèi)參的亮度來(lái)調(diào)模板的量

吃地苦中苦，方為人上人

17樓2011-09-22 16:29:22

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測(cè)定下CDNA的濃度再擴(kuò)增行不行？

18樓2011-12-26 21:48:13

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樓主做出來(lái)了嗎，我也遇到了問(wèn)題，請(qǐng)求聯(lián)系指教

19樓2012-04-17 09:37:32

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引用回帖:

9樓: Originally posted by facingworld at 2011-09-20 17:05:47
我現(xiàn)在就在試著調(diào)上樣量，可是很難調(diào)一直...

弱弱地問(wèn)一句就樓主后來(lái)調(diào)整內(nèi)參的亮度成功了么怎么最快的調(diào)整內(nèi)參亮度？需要測(cè)定模板CDNA的濃度再來(lái)調(diào)整么？小弟現(xiàn)在在做這個(gè)半定量很頭疼