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dl355538623木蟲 (正式寫手)
揚(yáng)帆遠(yuǎn)航
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[求助]
HPLC 色譜溶劑峰問題
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我最近做液相檢測(cè)，老在很早的時(shí)間出現(xiàn)雜峰，而且峰很大，我一直不知道這是什么峰，有人說溶劑峰，可是溶劑峰為什么那么大呢？而且影響我的樣品檢測(cè)，如圖所示，第一個(gè)峰很大，而后面的峰很小，不知道是什么問題。 而且，我做液相制備，收集第二個(gè)峰，進(jìn)行檢測(cè)，還是會(huì)出現(xiàn)第一個(gè)很大的溶劑峰，對(duì)我的質(zhì)譜檢測(cè)影響很大，一直檢測(cè)不出來。 不知道各位大俠知道是什么原因嗎？怎么去解決？ 我的流動(dòng)線是乙腈和水（0.1%TFA）；梯度洗脫，0-30min，乙腈5%-30%。 |
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wchao612
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
dl355538623(金幣+1): 我的樣品是蛋白肽，是經(jīng)過DEAE離子交換柱純化后的肽混合物，然后進(jìn)行液相HPLC制備，對(duì)后面的物質(zhì)峰進(jìn)行收集，然后再進(jìn)行分析，可是收集的峰，在檢測(cè)的時(shí)候還是會(huì)出現(xiàn)一個(gè)很大的所謂的溶劑峰；另外，DEAE純化后的物質(zhì)，冷凍干燥，然后溶解在水（1%TFA）中的。 2011-09-22 08:35:52
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的確是溶劑峰。判斷依據(jù)是出峰時(shí)間，和你的描述“還是會(huì)出現(xiàn)” 你的樣品溶媒是什么，進(jìn)一針溶媒就可徹底判斷。 |
5樓2011-09-22 08:14:42
2樓2011-09-21 18:47:49
秋葉漫漫
金蟲 (小有名氣)
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3樓2011-09-21 19:05:36
4樓2011-09-21 22:47:20
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