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何田田615木蟲 (小有名氣)
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[求助]
散金幣請(qǐng)教熒光顯微鏡染色問題？
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我用丫啶橙和碘化丙啶染色細(xì)菌（硫酸鹽還原菌），用尼康的倒置熒光顯微鏡觀測(cè)，我看文獻(xiàn)上說這種雙染色法可以出現(xiàn)兩種顏色，死菌是綠色，活菌是紅色，為什么我們?nèi)就暧^測(cè)的都是一種顏色，只是一種暗點(diǎn)，一種亮點(diǎn)（附圖）。我的激發(fā)光源是綠光。請(qǐng)教相關(guān)專家解答！不勝感激��！ |
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quiller2000
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
何田田615(金幣+5): 雖然沒給出準(zhǔn)確答案 ，但還是謝謝你了! 2011-09-23 10:51:11
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丫啶橙的激發(fā)波長為488,可以穿透細(xì)胞膜與DNA結(jié)合，發(fā)射綠色熒光；而碘化丙啶不能穿透細(xì)胞膜，只能穿透死亡的細(xì)胞，此時(shí)細(xì)胞膜破損，進(jìn)而與DNA結(jié)合，激發(fā)波長也是488，發(fā)出紅色熒光。 從你的圖片來看，似乎染料都沒有進(jìn)入細(xì)胞啊，同時(shí)你也沒有很好的對(duì)焦，因此無論是死細(xì)胞還是活細(xì)胞，好像不能給出判斷呢。PS，那些亮的可能是死細(xì)胞，呵呵。搞不清楚！ |
2樓2011-09-22 23:49:35
何田田615
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3樓2011-09-23 11:01:03
4樓2012-07-12 20:31:13
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