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zhymhbu木蟲 (正式寫手)
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[求助]
芽孢桿菌的表征，SEM STM 環(huán)境掃描電鏡
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自己分離到一個芽孢桿菌，準(zhǔn)備一個分離菌種和發(fā)酵特性的文章。 想要用電鏡表征一下菌體，包括營養(yǎng)體和芽孢體 用SEM很多，但是需要固定什么的 聽說環(huán)境掃描電鏡不需要處理，更適合微生物表征 有做過相關(guān)分析的朋友吧，期待指教。做環(huán)掃電鏡，對微生物樣品有什么要求，需要怎么處理樣品 |
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 電鏡表征 | SEM資料匯編 |
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★ ★ ★
zhymhbu(金幣+1): 好專業(yè)的回答。謝謝了 2011-09-27 10:08:42
rainwander(金幣+3, MicEPI+1): 鼓勵交流 2011-09-27 10:34:52
zhymhbu(金幣+1): 好專業(yè)的回答。謝謝了 2011-09-27 10:08:42
rainwander(金幣+3, MicEPI+1): 鼓勵交流 2011-09-27 10:34:52
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正常情況下，高真空模式圖像質(zhì)量和分辨率都要好。 微生物細(xì)胞等含水量大，不耐真空，真空脫水變形嚴(yán)重，在高真空或者低真空常規(guī)模式下觀察，都需要按照常規(guī)方法制樣，盡可能的保持細(xì)胞原裝到干燥為止，一般相對新鮮的細(xì)胞或者微生物原貌，一般會有大約10-15%的收縮，有些芽孢類收縮率高達(dá)60%，。就像棗，鮮棗和干棗外形有些不一樣，但我們都還知道那是棗，些許收縮，一般應(yīng)該不會影響識別，估計大家也都認(rèn)可。 常規(guī)或者換掃的差別主要體現(xiàn)在，是否追求活鮮的原貌。 在追求活鮮微小生命體原貌的道路上，冷凍電鏡技術(shù)走在前面，一種使用常規(guī)高真空模式觀察新鮮微生物或者細(xì)胞原貌。在電鏡樣品室安裝專門的冷凍樣品臺，在樣品室內(nèi)首先進(jìn)行冷凍，然后切割露出組織或者細(xì)胞，在電鏡樣品室內(nèi)噴金或者不噴金（組織體液具有一定導(dǎo)電性）直接觀察形貌。冷凍電子顯微術(shù)實現(xiàn)了高分辨觀察微小生物體新鮮原貌，但的我知道的國內(nèi)某單位招標(biāo)的最貴冷凍臺價格大約70萬人民幣，代價很高。 無論如何冷凍電鏡技術(shù)在操作技術(shù)上上還是比較難的，而且要獲得好的效果，代價高昂， 因此，生命科學(xué)顯微工作者發(fā)明了環(huán)境掃描電鏡技術(shù)，并進(jìn)行常規(guī)掃描電鏡的改造推廣， 這個技術(shù)后來賣給了飛利浦，現(xiàn)在的FEI環(huán)境掃描電鏡�？梢杂^察新鮮的微小生命體的原貌，當(dāng)然設(shè)置好條件，你也可以動態(tài)觀察，細(xì)胞水分揮發(fā)，收縮變形的過程。 從指標(biāo)上看環(huán)境掃描電鏡分辨率也非常高，不過國內(nèi)做環(huán)掃的大多水平不高，這個和使用機(jī)制有關(guān)系，大多數(shù)情況下得不到好的結(jié)果，也許實驗室的操作人員會建議你使用環(huán)境掃描電鏡的常規(guī)模式。 |
10樓2011-09-27 01:14:56
2樓2011-09-25 10:50:21
bohr86
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9樓2011-09-26 19:24:56
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