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lcfzm新蟲 (小有名氣)
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[求助]
【求助】ppic9K 插入目的片段后載體發(fā)生剪切
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| 我將一個抗菌肽基因連接到ppic9k上,測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)基因序列完全正確,但是緊接著基因下游的載體序列發(fā)生了剪切,我測序了2個克隆,正確的載體在ppic9k序列上的位置是 1249bp處,而我的2個克隆在ppic9k序列上的位置分別是2613bp處和5670bp處,怎么這兩個克隆還完全不一樣,而且連酶切位點的序列都找不到,請大家?guī)兔Ψ治鲆幌率鞘裁丛,我之前連接過這個載體,都表達過兩個蛋白了,從來沒遇到過這么奇怪的問題,而且之前這個基因出現(xiàn)過一次這樣的情況,當(dāng)時以為是載體錯誤,又重新連接,結(jié)果又是一樣。郁悶之極!請大家?guī)兔Γ。。? |
質(zhì)粒表達 |
銅蟲 (小有名氣)
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材料學(xué)碩,求調(diào)劑
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