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muxiachuixue木蟲 (正式寫手)
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[求助]
雜質(zhì)峰過多
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小弟最近做HPLC時(shí)遇到幾個(gè)問題，跟大家請(qǐng)教 樣品：黃酮葡萄糖醛酸苷（非流動(dòng)相溶解）樣品顏色：紅色 溶解性：甲醇、水、乙腈都較好 柱子：25cm,4.6mm C18 流動(dòng)相:25%乙腈：75%水（0.1%甲酸） 柱溫：室溫 主峰保留時(shí)間：48min左右 主峰高500mUA左右，寬3min~4min左右 大家看看我的圖，前面的雜質(zhì)峰咋這么多呢，而且基線也一直不平，平衡柱子的時(shí)候基線是平的，之前樣品是經(jīng)過制備HPLC分過的，所以問兩個(gè)問題： 1. 2~15min之間不規(guī)則的雜質(zhì)峰到底是因?yàn)橄到y(tǒng)波動(dòng)還是真的雜質(zhì)？ 2. 主峰放大后后面的尾巴是不平滑的，難道里面還有一個(gè)峰？還是拖尾時(shí)都這樣？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
muxiachuixue(金幣+10): 2 2011-10-05 19:24:02
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（1）主峰高500mUA，看樣子你的雜質(zhì)峰最大也達(dá)到200mUA，況且，儀器波動(dòng)也不會(huì)是這樣的。所以很有可能是雜質(zhì)。另外，你的化合物是從制備液相制來的，所以看看你的制備條件，保留時(shí)間太長(zhǎng)的話，容易制備不純的。如果你想再確定下的話，加大進(jìn)樣量，看看這些雜質(zhì)峰與主峰的相對(duì)峰高是否有變化。 （2）不平可能就是里面還含有東西。你可以改變一下條件，乙腈濃度大點(diǎn)，讓目標(biāo)峰早點(diǎn)出，這樣看起來會(huì)更明顯是不是主峰里面含有別的成分。另外，就這么兩個(gè)峰，你干嘛搞到40多分鐘才出峰？峰都展寬到3-4分鐘了，分析條件有問題，應(yīng)該改善下。 |
7樓2011-10-05 18:33:33
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3樓2011-10-05 15:45:10
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4樓2011-10-05 15:53:24
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5樓2011-10-05 15:57:21
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