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wangdandelia木蟲 (正式寫手)
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[求助]
切膠回收 已有5人參與
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請問各位前輩，切膠純化的時(shí)候，用promega柱子回收需要哪些注意事項(xiàng)呢？ 我們回收PCR產(chǎn)物，都是按照說明書操作的，可是回收率特別低，120ug的PCR產(chǎn)物回收后才得到2.5ug。謝謝咯！ |
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asznpb
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4樓2011-10-09 12:19:07
asznpb
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★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
adslye(金幣+4): 鼓勵(lì)交流，祝順利！ 2011-10-10 09:20:52
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adslye(金幣+4): 鼓勵(lì)交流，祝順利！ 2011-10-10 09:20:52
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1,binding 和膠完全混合后掛柱子時(shí)候多重復(fù)兩次，而且轉(zhuǎn)速不宜太快，5000rpm足夠了，再高就不大好了 2、75%乙醇洗滌完了注意要開蓋空轉(zhuǎn)，蒸發(fā)乙醇 3、洗脫的時(shí)候加雙蒸水或elution buffer后在37℃放幾分鐘之后再離心洗脫 最后一步洗脫的時(shí)候多重復(fù)兩次洗脫，每次用洗脫下的雙蒸水或者elution buffer再重新加到柱子里重復(fù)洗脫 |
2樓2011-10-09 11:23:36
lvbobo823
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3樓2011-10-09 11:33:38
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6樓2011-10-09 15:37:52
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