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萌1986新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
生物素活化步驟？
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大家好~~~ 本人在做有關(guān)生物素標(biāo)記抗體，首先需要將生物素活化。 我們用的生物素是sigma公司的B4501的生物素，需制成NHS-Biotin，請(qǐng)各位高手提供一下詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟，以及NHS-Biotin與抗體標(biāo)記的步驟，不勝感謝。 請(qǐng)寫(xiě)明所查資料的出處，謝謝！ |
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luoyan2006
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2樓2011-10-09 19:39:14
萌1986
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3樓2011-10-10 09:18:37
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4樓2011-10-10 09:19:36
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幫頂�。�！不懂�。�！ 5樓2011-10-13 15:02:16
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6樓2011-10-14 16:43:30
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跟樓主同感。 手頭有一篇，還沒(méi)試。Electrogenerated Chemiluminescence. 80. C-Reactive Protein Determination at High Amplification with [Ru(bpy)3]2+-Containing Microspheres，supporting information里的: Biotinylation of Anti-CRP. Briefly, ~4.5 mg of sulfo-NHS-LC-biotin was added to 1 mL of ~ 90 mg/mL anti-CRP PBS solution (pH 7.2), and the reaction was allowed to proceed for ~30 min at room temperature. Free biotin molecules were subsequently removed by a Sephadex G-25 PD-10 desalting column (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ). The final product with a concentration of ~15 mg biotinylated anti-CRP/mL in PBS (pH 7.2) was stored at ~4 ?C prior to use. |
7樓2011-10-28 11:27:33
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