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小皇帝余同學(xué)銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
多糖超濾方面的問(wèn)題，嘿嘿~~
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| 小弟做多糖，DEAE鹽洗后HPLC跑出兩個(gè)峰，一個(gè)分子量200多萬(wàn)刀，另一個(gè)大約幾十萬(wàn)刀，第一步先用1000D的膜超濾除鹽，接下來(lái)應(yīng)該用多少的濾膜超濾樣品把他們分離出來(lái)比較合適？Sample Text |
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2樓2011-10-11 10:43:15
小皇帝余同學(xué)
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3樓2011-10-11 14:11:26
4樓2011-10-11 14:20:59
小皇帝余同學(xué)
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5樓2011-10-11 20:36:31
6樓2011-10-12 10:29:45
小皇帝余同學(xué)
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7樓2011-10-12 10:38:12
mssj300130
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首先你的大小一個(gè)是2M一個(gè)是200K，200K的很難通過(guò)超濾去除的，即使是300K的膜包；另外你在上柱前的確應(yīng)該考慮乙醇的分級(jí)沉淀，或者季銨鹽等等，方法的話可以差一些多糖方面的文獻(xiàn)，還有就是你除鹽用1K的速度豈不是很慢很慢，用G-25 medium脫鹽的話比較好應(yīng)該，當(dāng)然這樣看你有多少樣品了，樣品比較多的話用大一點(diǎn)的膜包100K除鹽可能都沒(méi)問(wèn)題的，上柱條件可以摸索一下，這兩個(gè)都是酸性多糖，如果采用不同的鹽濃度基本上會(huì)有一個(gè)分子量上的對(duì)應(yīng)，這個(gè)跟做多糖疫苗的純化比較相似 還有就是為什么不加分。。。 |
8樓2012-04-10 14:42:42
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