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zlong2008木蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于HPLC保留時間的問題
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| 這幾天一直在做hplc.但是每天的標(biāo)準(zhǔn)品保留時間都不一樣，而且是越來越長。最短的和最長的能夠相差將近20分鐘，剛開始沒有用柱溫箱，今天用了，柱壓明顯降低，但是保留時間卻比沒有用柱溫箱的時候延長了。流動相是一樣的，進樣量也是一樣的，請問問題出在哪里啊。是不是色譜柱有問題了啊。 |
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2樓2011-10-15 14:57:56
zlong2008
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4樓2011-10-15 16:43:15
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5樓2011-10-16 10:37:08
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6樓2011-10-16 18:55:44
7樓2011-10-16 19:03:07
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【答案】應(yīng)助回帖
zlong2008(金幣+1): 謝謝，這些問題以前沒有考慮到 2011-10-19 16:57:02
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首先一個是流動相的準(zhǔn)確性，有些物質(zhì)對流動相比例要求很高，所謂差之毫厘，謬以千里，而且你是梯度洗脫，不知道你有沒有使用緩沖鹽？（我以前做過厄貝沙坦的方法摸索，有一個緩沖鹽配得差一點，時間就差得離譜） 其次系統(tǒng)是否存在漏液現(xiàn)象，有漏液的話，保留時間相差也會千奇百怪的，這個峰面積會有所體現(xiàn)（如果進樣用樣品濃度一致的話） 第三，柱壓，你這個柱壓差得太離譜了，Agilent的柱壓一般都很穩(wěn)定的，島津的波動可能大點，但是相差50，肯定是有系統(tǒng)原因的絕對不是偶然因素。 第四就是柱效了，有沒有觀察柱效啊，柱效有沒有波動？ |
8樓2011-10-17 01:06:19
shooseal
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9樓2011-10-17 01:08:22
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10樓2011-10-19 16:37:36
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