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2140061銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
pet30a怎么構(gòu)建C端His-tagged的載體啊？
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| pet30a載體在MCS兩端都有His-tagged，怎么構(gòu)建講目的蛋白只在C端His-tagged的載體啊？ |
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susizheng
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2樓2011-10-21 08:51:48
sl35537417
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3樓2011-10-21 08:58:12
susizheng
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4樓2011-10-21 09:16:28
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5樓2011-10-21 22:38:02
susizheng
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【答案】應(yīng)助回帖
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不是的，你不是只需要C端由his-taq嗎？那么連接的時(shí)候，上游引物引物引入Nde I酶切位點(diǎn)，這樣就可以切掉N端的his-taq。然后下游引物設(shè)計(jì)的時(shí)候需要突變掉終止密碼子，這樣C端才能保留his-taq，不然基因表達(dá)到his-taq之前就終止了。 我覺(jué)得你需要把PET30a質(zhì)粒的物理圖譜好好看看。應(yīng)該可以看懂的。 |
6樓2011-10-22 09:59:53
loganfan
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7樓2011-10-22 18:51:38
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8樓2011-10-22 21:55:50
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