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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 動植物 » 綜合其他 » 怎樣得到棉花懸浮細胞
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bubingwu新蟲 (小有名氣)
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[求助]
怎樣得到棉花懸浮細胞
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請教各位： 本人想得到棉花的懸浮細胞，現(xiàn)在已經(jīng)從棉花無菌苗截取了下胚軸在1/2MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)了，不知道以后怎么操作，比如隔多長時間換培養(yǎng)基，大約換多少次就可以做懸浮？具體步驟，急求……………… |
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【答案】應助回帖
★ ★ ★
amisking(金幣+3): 鼓勵發(fā)帖交流！ 2011-10-27 20:51:25
amisking(金幣+3): 鼓勵發(fā)帖交流！ 2011-10-27 20:51:25
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從無菌苗下胚軸切段誘導愈傷組織。無菌苗的制備、 愈傷組織的誘導及胚性愈傷組織的獲得參照吳家和(棉花體細胞增殖和胚胎發(fā)生中的細胞程序性死亡[J ])的方法進行 從固體培養(yǎng)基上挑選 4～6 g 不同狀態(tài)的胚性愈傷置于100 ml 三角瓶 ,加入 40 ml MS 液體培養(yǎng)基,在水平搖床上懸浮振蕩培養(yǎng)。搖床速率 120 r· min21,培養(yǎng)溫度(28 ±1) ℃,每天 12 h 光照。以后 ,每隔13 d取10 ml 懸浮細胞到盛有 30 ml 新鮮MS液體培養(yǎng)基的三角瓶中繼代懸浮培養(yǎng)。 |
2樓2011-10-27 17:50:44
bubingwu
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 244.3
- 帖子: 76
- 在線: 22.3小時
- 蟲號: 1380564
- 注冊: 2011-08-26
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
3樓2011-10-27 23:15:04
4樓2011-10-28 11:18:52
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