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Samfain

金蟲 (正式寫手)

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[求助] 如何分離乳酸菌細(xì)胞壁

求組，哪位高人知道如何分離乳酸菌細(xì)胞壁，并不完全破壞細(xì)胞壁！求指點(diǎn)�。。。。。。。。。�！非常感激。。。。。。

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1樓 2011-10-31 11:40:22

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我117623326

新蟲 (小有名氣)

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專業(yè): 纖維

【答案】應(yīng)助回帖

Samfain(金幣+5): 好專業(yè)啊，有簡單的方法嗎？需要得到細(xì)胞壁。謝謝! 2011-11-08 18:46:35

用50mM Tris-HCL緩沖液(pH 7.8)懸浮菌體，進(jìn)行超聲波破碎，細(xì)胞濃度為0.06g/ml，破碎功率330W，工作215次(工作時間3s，間隔時間5s)，離心取上清液即為粗酶液。60%硫酸銨沉淀，Sephacryl S-300 HR凝膠層析，Native-PAGE割膠回收純化了發(fā)酵乳桿菌的CEP，用純化的CEP 酶解脫脂乳，酶解液ACE抑制率為50% 。SDS-PAGE檢測CEP分子量為32.5kDa，最適酶反應(yīng)溫度為41℃，最適酶反應(yīng)pH為8.0。Mg2+，Co2+，Ca2+對CEP活性有激活作用；Zn2+, Ni2+，PMSF，EDTA對CEP活性有抑制作用

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回復(fù)此樓

Holdon!

2樓2011-11-07 19:42:43

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