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[求助]
【求助】關(guān)于內(nèi)標(biāo)法的做標(biāo)準(zhǔn)曲線
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| 剛接觸色譜這塊，對(duì)內(nèi)標(biāo)法不是太了解，想請(qǐng)教一下論壇的朋友們關(guān)于內(nèi)標(biāo)法做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，縱坐標(biāo)和橫坐標(biāo)分別為什么?我看到關(guān)于縱坐標(biāo)一般都是響應(yīng)值之比，橫坐標(biāo)有些說(shuō)是待測(cè)濃度，有些說(shuō)待測(cè)濃度和內(nèi)標(biāo)的比值，請(qǐng)問(wèn)大家這兩種哪一種是正確的？謝謝！ |
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 氣相色譜資料匯編 | 123789 |
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8樓2011-11-10 09:27:27
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2樓2011-11-09 13:29:46
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3樓2011-11-09 15:25:52
【答案】應(yīng)助回帖
xiaoruan(金幣+2): 2011-11-09 22:13:26
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1 前言 內(nèi)標(biāo)法是經(jīng)典的色譜定量方法，在配制分析樣品時(shí)要求加入一個(gè)或數(shù)個(gè)內(nèi)標(biāo)物組份，內(nèi)標(biāo)物必須是分析樣品中不含有的組份，而且要求與樣品中的其它組份有良好的分離[1，2]。由于受分離因素制約，很多情況下給內(nèi)標(biāo)物的選擇帶來(lái)不便，有時(shí)甚至無(wú)法選到合適的內(nèi)標(biāo)物。鑒于這種情況，我們嘗試將內(nèi)標(biāo)法與疊加法相結(jié)合成為一種新的定量方法，稱為疊加內(nèi)標(biāo)法，用于沒(méi)有合適內(nèi)標(biāo)物的場(chǎng)合。 2 疊加內(nèi)標(biāo)法定量原理 已知某樣品中含有k，i，x三個(gè)組份(可以有更多的組份，x1，x2，x3......)，命名k組份為峰面積校正組份，i組分為疊加內(nèi)標(biāo)組份，x組分為任意組份，樣品經(jīng)色譜分離后得到三個(gè)組份的峰面積分別為Ak，Ai，Ax，上述三個(gè)組份相對(duì)于i組份的校正因子分別為Fki、1.000和Fxi，樣品中三個(gè)組份的含量分別為Ck、Ci和Cx。現(xiàn)分別準(zhǔn)確稱取m克樣品和Ws克i組份，然后將二者混合，混合物稱為加標(biāo)樣品。加標(biāo)樣品經(jīng)色譜分離后得到三個(gè)組份的峰面積分別是：k組份峰面積為A1，i組份峰面積為A2（A2是樣品中原有的i組份和加入的疊加i組份共同構(gòu)成的峰面積）。x組份或其它組份峰面積與計(jì)算無(wú)關(guān)。求樣品中各組份百分含量的步驟如下： 2．1 利用k組份進(jìn)行峰面積校正 令k組份加標(biāo)后與加標(biāo)前的峰面積的比值為K（k組份加標(biāo)后與加標(biāo)前的峰面積在理論上是相同的，此處引入校正系數(shù)K的目的是為了消除進(jìn)樣量誤差），則K的表達(dá)式為： K = A1/Ak （1） 再利用K對(duì)加標(biāo)前的k，i，組份的峰面積進(jìn)行修正如下： A = K×Ak （2） B = K×Ai （3） 式（2）、式（3）中的K為加標(biāo)后與加標(biāo)前的兩次進(jìn)樣的峰面積校正系數(shù)，雖然K是從組份k得到的，但亦適合其它組份。A和B分別為Ak和Ai的校正值。 2．2 引入疊加法 引入疊代法的計(jì)算公式[1]： W=Ws×A0/(Ah-A0) (4) 在式（4）中，W 表示樣品中原有內(nèi)標(biāo)物組份的重量；Ws表示加入的那部分內(nèi)標(biāo)物組份的重量；A0表示樣品中原有內(nèi)標(biāo)物組份的峰面積；Ah 表示加標(biāo)后內(nèi)標(biāo)物組份總的峰面積。 在本文中，A2相當(dāng)于Ah，B相當(dāng)于A0，W與Ws含義不變，因此有： W = B×Ws/(A2-B) （5） 將式（1）及式（3）代入式（5）可得式（6） W = (A1/Ak)×Ai×Ws/[A2-(A1/Ak)×Ai] （6） 式（6）又可寫(xiě)成： W = A1×Ai×Ws/(Ak×A2-A1×Ai) （7） 2．3 引入內(nèi)標(biāo)法 引入內(nèi)標(biāo)法計(jì)算公式[1]： Cx=(Ax/As) ×Fxs×100×W/m (8) 式（8）中，Cx為樣品中x組份的含量；W為樣品中原有內(nèi)標(biāo)物組份s的重量；m為樣品的重量；Fxs為被測(cè)組份x相對(duì)于內(nèi)標(biāo)物組份s的校正因子；Ax 、As分別為組份x和內(nèi)標(biāo)物組份s的峰面積。 在本文中，疊加內(nèi)標(biāo)組份i相當(dāng)于式（8）中的內(nèi)標(biāo)物組份s，其它各項(xiàng)意義相同，因此可導(dǎo)出疊加內(nèi)標(biāo)法定量計(jì)算公式： Cx = （Ax/ Ai）×Fxi×100×W /m （9） 2．4 綜合結(jié)論 綜合2及3中的結(jié)論式（7）和式（9）可得疊加內(nèi)標(biāo)法定量計(jì)算公式： Cx = Ax×Fxi×100×A1×Ws/[（Ak×A2-Ai×A1）×m] （10） 3 疊加內(nèi)標(biāo)法與疊加法和內(nèi)標(biāo)法的比較 3．1 優(yōu)點(diǎn) 與內(nèi)標(biāo)法比較： （1）疊加內(nèi)標(biāo)法的內(nèi)標(biāo)物可以是被測(cè)樣品中已有的組分，因此，不必考內(nèi)標(biāo)物的分離問(wèn)題，可以選擇樣品中分離良好的任一組分為內(nèi)標(biāo)物； （2）用于沒(méi)有合適內(nèi)標(biāo)物的場(chǎng)合。 （3）對(duì)進(jìn)樣量準(zhǔn)確性要求不嚴(yán)格。 與疊加法的比較：在疊加法中，一次加入只能測(cè)定一個(gè)組份，在對(duì)多組份樣品進(jìn)行測(cè)定時(shí)需要多次加入和多次進(jìn)樣；而疊加內(nèi)標(biāo)法只需要一次加入和兩次進(jìn)樣即可以同時(shí)測(cè)定多個(gè)組份。 3．2 缺點(diǎn) 與內(nèi)標(biāo)法比較：需兩次進(jìn)樣，即分別測(cè)量一次樣品和加標(biāo)樣品。 與疊加法比較：在測(cè)定內(nèi)標(biāo)物以外的組份時(shí)需要知道該組分的校正因子 |
4樓2011-11-09 18:52:35
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