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chaohu1127銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
求問(wèn)：sigma 生物素NHS-Biotin（H1795）誰(shuí)用過(guò)？低濃度連抗體是否連不上？
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各位高手，我用的sigma的H1795貨號(hào)的生物素連抗體，步驟如下。 低濃度的抗體：用緩沖液配好的0.1mg/ml 純化過(guò)的抗體（超濾過(guò)疊氮鈉）100ul 和DMF溶解的0.22mg/ml 生物素 5ul 于25度下反應(yīng)2小時(shí)（搖床中），加入4ul 0.01M NH4Cl 溫育10min，PBS超濾3次，貯存為0.1mg/ml . 看到一些討論說(shuō)連接反應(yīng)ph 很重要，試過(guò)7.4 8.5 9.5三種PH，好像都沒(méi)反應(yīng)上。 想問(wèn)問(wèn)是不是這種標(biāo)記反應(yīng)需要高濃度，像我這種低濃度就不行啦？ |
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lynni
木蟲 (正式寫手)
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4樓2011-12-26 22:26:42
chaohu1127
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2011-11-15 16:12:59
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