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[交流]
關(guān)于ORF的選擇,以及啟動子的疑問
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1、不同物種的同一個蛋白的mRNA,他們的-35,-10SD區(qū)域有保守性嗎?我找了幾個cDNA比對,沒發(fā)現(xiàn)什么保守性啊 2、應(yīng)該怎樣解釋,5‘-UTR中有N個ATG,但只選擇其中的一個作為起始密碼子呢?生物體到底是怎樣的識別機制啊,真核蛋白放到大腸桿菌中表達,會有影響嗎 3、啟動能力強弱之分怎么判斷呢,會影響表達速率否 |
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1.根據(jù)物種的進化歷程,親緣越近,保守性越高,反之亦然。不同物種的cDNA保守性很難說吧,看親緣關(guān)系了。 2.選擇啟動子后第一個ATG作為起始密碼子,核糖體識別mRNA后沿啟動子向下移動遇到第一個ATG起始轉(zhuǎn)錄;真核蛋白在大腸桿菌中表達有無影響的問題,多少會有。因真核蛋白翻譯后有一系列糖基化,氨基化等加工修飾過程,而大腸桿菌不具備這些功能。 3.通過起始轉(zhuǎn)錄的能力或者表達同一蛋白的水平高低進行區(qū)分。會影響表達速率的,起碼相同時間段表達量差很多。說白了,有時是1g/l 和1mg/l的區(qū)別 |
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