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求助:天然藥化的幾個(gè)常見問題
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本人新手,向各位高手請(qǐng)教幾個(gè)天然藥化的常見問題: 1. 怎樣將TLC的條件轉(zhuǎn)移至色譜柱上?是先摸索最優(yōu)的分離系統(tǒng)后再將極性降低,使最上面的點(diǎn)(或者感興趣的點(diǎn))的Rf值為0.2-0.3嗎? 2. 梯度洗脫時(shí)怎樣確定換梯度的極性和時(shí)機(jī),如果采用固定體積的梯度洗脫方式,一般一個(gè)梯度沖多少體積?如果采用TLC指導(dǎo)洗脫,怎樣確定更換極性的時(shí)間?梯度要怎樣設(shè)計(jì)? 這些問題感覺對(duì)分離效果影響很大,謝謝指導(dǎo)! |
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依次作答:1.先選用合適的色譜柱,再用TLC洗脫條件沖洗就行;將感興趣的點(diǎn)的Rf值調(diào)為0.2-0.3很合適 2.將一個(gè)點(diǎn)快沖完時(shí)就可換梯度,如果采用固定體積的梯度洗脫方式,應(yīng)根據(jù)色譜柱和樣品量來決定洗脫體積;如果采用TLC指導(dǎo)洗脫,怎樣確定更換極性的時(shí)間?將一個(gè)點(diǎn)快沖完即可;梯度要怎樣設(shè)計(jì)?一般要盯住某個(gè)點(diǎn),以此作為參照沖洗,沖完后再換點(diǎn)。 互相學(xué)習(xí)一下,呵呵! |
| 一般淋洗劑是采用TLC分析得到的展開劑的比例再稀釋一倍后的溶劑,某種樣品在這種展開劑中只顯示一個(gè)點(diǎn),并不等于在別的展開劑中也只顯示一個(gè)點(diǎn)。因此在尋找展開劑時(shí),多嘗試幾種比例不同,成分不同的展開劑。展開劑的極性太小,點(diǎn)分不開,極性太大,也分不開.一般以目標(biāo)產(chǎn)物的Rf值在0.3左右為最佳。 |
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TLC展開劑的選擇可以很多,但是沖柱子,有的溶劑就不合適,所以,在選擇展開劑時(shí)最好考慮一下可否應(yīng)用到柱子上面。星辰同學(xué)說的對(duì),有點(diǎn)在不同的展開劑中顯示的不一樣,會(huì)有包點(diǎn)的狀況,多試幾種確定一下為好。 用TLC追蹤沖柱,關(guān)鍵要勤快點(diǎn)關(guān)注好你要的主成分盯緊了,尤其是條件摸索階段的時(shí)候。固定體積沖洗,應(yīng)該還是要建立在有一定了解的基礎(chǔ)上吧,做預(yù)實(shí)驗(yàn)什么的。 |
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