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熒光量子產(chǎn)率使用的標(biāo)準(zhǔn)參比stilbene 420的熒光量子產(chǎn)率是多少?
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| 熒光量子產(chǎn)率使用的標(biāo)準(zhǔn)參比stilbene 420的熒光量子產(chǎn)率是多少。考鼻蟾呤纸獯,不勝感激 |
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二氯熒光素量子產(chǎn)率的測(cè)定 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 1、了解熒光分析法及測(cè)量熒光物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率的基本原理。 2、掌握二氯熒光素量子產(chǎn)率的測(cè)量方法和相關(guān)影響因素。 二、方法原理 熒光分析法在有機(jī)電致發(fā)光、生物醫(yī)藥、臨床診斷等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。高性能熒光材料的制備已成為這些領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)與前沿,而這些熒光材料的熒光量子產(chǎn)率的高低直接影響它們的性能優(yōu)劣。熒光量子產(chǎn)率(YF)即熒光物質(zhì)吸光后所發(fā)射的熒光的光子數(shù)與所吸收的激發(fā)光的光子數(shù)之比值。它的數(shù)值在通常情況下總是小于1。YF的數(shù)值越大則化合物的熒光越強(qiáng),而無(wú)熒光的物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率卻等于或非常接近于零。 熒光量子產(chǎn)率一般采用參比法測(cè)定。即在相同激發(fā)條件下,分別測(cè)定待測(cè)熒光試樣和已知量子產(chǎn)率的參比熒光標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩種稀溶液的積分熒光強(qiáng)度(即校正熒光光譜所包括的面積)以及對(duì)一相同激發(fā)波長(zhǎng)的入射光(紫外-可見(jiàn)光)的吸光度,再將這些值分別代入特定公式進(jìn)行計(jì)算,就可獲得待測(cè)熒光試樣的量子產(chǎn)率: Yu = Ys · · Yu、Ys —待測(cè)物質(zhì)和參比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率; Fu、Fs —為待測(cè)物質(zhì)和參比物質(zhì)的積分熒光強(qiáng)度; Au、As —為待測(cè)物質(zhì)和參比物質(zhì)在該激發(fā)波長(zhǎng)的入射光的吸光度(A=εbc)。 運(yùn)用此公式時(shí)一般要求吸光度As、Au低于0.05。參比標(biāo)準(zhǔn)樣最好選擇其激發(fā)波長(zhǎng)值相近的熒光物質(zhì)。有分析應(yīng)用價(jià)值的熒光化合物的Yu一般常在0.1-1之間。 三、儀器和試劑 1、分子熒光光譜儀;紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì); 2、二氯熒光素(5.0μg·mL-1)待測(cè)試樣溶液(含1.0mol·L-1 NaOH水溶液);羅丹明B(5.0μg·mL-1)參比標(biāo)準(zhǔn)溶液(溶劑為無(wú)水乙醇); 3、熒光比色皿一個(gè),紫外石英比色皿一對(duì);10 mL具塞比色管、移液管。 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1、移取所需濃度的二氯熒光素與羅丹明B溶液,用相應(yīng)溶劑稀釋至10.0 mL(A505nm<0.05),在紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)上測(cè)定其吸收光譜曲線;分別測(cè)定它們?cè)?05 nm處的吸光度。 2、移取上述相同的溶液于熒光比色皿中,在熒光儀上分別掃描其熒光激發(fā)光譜及發(fā)射光譜;分別測(cè)定它們以505 nm為激發(fā)波長(zhǎng)時(shí)的熒光發(fā)射光譜。 五、結(jié)果處理 1、計(jì)算二氯熒光素和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)羅丹明B的熒光光譜的相對(duì)積分面積。 2、從相關(guān)資料查閱參比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)羅丹明B在乙醇溶劑中的量子產(chǎn)率。 3、將所獲得的各相關(guān)數(shù)據(jù)代入熒光量子產(chǎn)率計(jì)算公式計(jì)算二氯熒光素溶液的量子產(chǎn)率數(shù)值。 六、注意事項(xiàng) 1、如何測(cè)定某物質(zhì)的熒光激發(fā)光譜與發(fā)射光譜曲線? 2、測(cè)量某熒光物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率時(shí),如何選擇熒光參比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),它的作用是什么? 3、吸光度的測(cè)定與測(cè)定熒光光譜的面積時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)為什么要一致? 4、為什么要求待測(cè)物質(zhì)與熒光參 https://wenku.baidu.com/view/2839210d7cd184254b353534.html |

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