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xiaochangwen銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
求助 SSR實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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我做的是玉米SSR標(biāo)記 同一批試劑 是在半年前買(mǎi)的,半年前做的時(shí)候效果很好 得到的普帶也很清晰 可最近做卻做不出來(lái)了,不知道是什么原因。 這個(gè)是半年前做的 這個(gè)是最近做的,左側(cè)點(diǎn)的是mark 500 400 300 200 150 100 50bp |
新蟲(chóng) (初入文壇)
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

銀蟲(chóng) (小有名氣)
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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我做的時(shí)候一般20-100ng,一開(kāi)始還很?chē)?yán)格,大量的做了其實(shí)也都沒(méi)這么嚴(yán)格。但是我一般都會(huì)測(cè)濃度,不同樣本調(diào)成同一濃度,至于量多點(diǎn)少點(diǎn)我覺(jué)得問(wèn)題不大。 問(wèn)題了,我看了你的圖,我覺(jué)得應(yīng)該不是染色的問(wèn)題,應(yīng)該是沒(méi)產(chǎn)物。至于你的PCR哪里出問(wèn)題了,我也不知道。首先關(guān)注模版和引物。重提2、3個(gè)新鮮葉片的DNA,新合成2、3對(duì)引物,和原來(lái)的2、3個(gè)模版,2、3對(duì)引物完全隨機(jī)PCR對(duì)比,可能會(huì)找到原因。 |

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