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grape114金蟲 (正式寫手)
Biosimilars
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[求助]
重疊延伸；配對(duì)堿基數(shù)目
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我的東西小，沒(méi)用模板，想直接兩個(gè)引物重疊延伸pcr，出現(xiàn)個(gè)問(wèn)題 現(xiàn)在有兩個(gè)方案，一個(gè)是只重疊配對(duì)11個(gè)堿基，最后一個(gè)是重疊15個(gè)堿基但是組后3個(gè)堿基是5‘>TTA<3',然后還有一個(gè)環(huán)，現(xiàn)在選擇哪個(gè)方案？方案一怕配對(duì)太少重疊不出來(lái)，方案2怕有環(huán)不好延伸，求指點(diǎn)？如果11個(gè)能重疊延伸出來(lái)最好 |
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2樓2011-11-26 11:44:11
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我的東西不大，不多設(shè)點(diǎn)互補(bǔ)部分是引物長(zhǎng)度要控制在59bp啊，你懂得，我設(shè)計(jì)過(guò)13個(gè)堿基互補(bǔ)的，不過(guò)那個(gè)最后一個(gè)是T,從倒數(shù)第二個(gè)開始就形成環(huán)了，pcr效果不好，所以這次改進(jìn)下，兩個(gè)方案，互補(bǔ)11個(gè)堿基，引物環(huán)少，能量低，但配對(duì)少啊，15個(gè)堿基互補(bǔ)的，也行，但是倒數(shù)第四個(gè)開始就有個(gè)環(huán)，最后三個(gè)還是TTA，我不知道選用那個(gè)啊？ |
3樓2011-11-26 13:02:23
imyting
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4樓2011-11-26 13:39:34
grape114
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5樓2011-11-26 14:53:59
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6樓2011-11-26 17:05:58
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7樓2011-11-30 15:15:14
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