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[交流]
TLC跑板什么現(xiàn)象都沒(méi)有出現(xiàn) 已有32人參與
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| 我做TLC跑板，在紫外分析儀下觀察，為什么什么現(xiàn)象都看不到，第一次接觸這個(gè)東西，很是郁悶啊 |
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2、 皂苷 （1）泡末試驗(yàn)：振搖 →大量持續(xù)性泡末 +0.1M HCl 二管泡末高度相同（三萜皂苷） +0.1M NaOH 堿管高于酸管（甾體皂苷） （2）溶血試驗(yàn)：+2%紅血球懸浮液 →溶血 （3）Lieberman—Burchard反應(yīng)：+醋酐-濃硫酸—— 紫紅色（三萜皂苷） 黃-紅-紫-污綠（甾體皂苷） （1）泡沫試驗(yàn)：取檢品的水溶液2ml于帶塞試管中，用力振搖3分鐘，即產(chǎn)生持久性蜂窩狀泡沫（維持10分鐘以上），且泡沫量不少于液體體積的1／3。 【注】常用的增溶劑吐溫、司盤(pán)，振搖時(shí)均能產(chǎn)生持久性泡沫，要注意區(qū)別。 （2）溶血試驗(yàn)：取試管4支，分別加入濾液0.25、0.5、0.75 ml，然后依次分別加入生理鹽水2.25、2.0、1.75、1.5 ml，使每一個(gè)試管中的溶液都成為2.5ml, 再將各試管加入2％的血細(xì)胞懸液2.5ml，振搖均勻后，同置于370水浴或25－270的室溫中注意觀察溶血情況，一般觀察3小時(shí)即可，或先滴紅細(xì)胞于顯微鏡下，然后滴加檢液看血細(xì)胞是否消失。如有溶血現(xiàn)象示正反應(yīng)。 【注】①鞣質(zhì)對(duì)血紅細(xì)胞有凝集作用，干擾溶血試驗(yàn)的觀察，應(yīng)事先除去（可用取勝酰胺粉吸附或用明膠沉淀）。 ②檢液應(yīng)為中性溶液。 （3）醋酐濃硫酸試驗(yàn)（Liebrmann Burchard反應(yīng)）取檢品的水溶液置蒸發(fā)皿中，于水浴上蒸干，殘?jiān)尤肷倭勘姿崾谷芙�，再加入醋酐濃硫酸�?9：1）試液，呈現(xiàn)紅紫色并變成污色綠色（甾類、三萜類成分或皂甙） （4）區(qū)別甾體皂甙和三萜皂甙：取帶塞試管兩支，各盛檢品的水溶解1 ml，1支加0.1N鹽酸溶液2ml，另一支加0.1N氫氧化鈉溶液2ml用力振搖1分鐘（需左右手交替振搖各半分鐘），觀察兩管泡沫的多少，若兩管泡沫體積相同或酸管多，示含三萜式皂甙；若加堿管泡沫多于加酸管示含甾示含甾體皂甙。 三萜皂甙為酸性皂甙在酸性水溶液中形成較穩(wěn)定的泡沫；甾體皂甙為中性皂甙在堿笥溶液中能形成較穩(wěn)定的泡沫。 濃硫酸、高氯酸、高氯酸-香草醛、濃硫酸-香草醛等的顯色原理主要是使羧基脫水，增加雙鍵結(jié)構(gòu)，再經(jīng)雙鍵位移，雙分子縮合等反應(yīng)生成共軛雙鍵系統(tǒng)，又在酸作用下形成陽(yáng)碳離子鹽而顯色 |
34樓2011-12-14 00:52:56
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