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yuanzhang銅蟲 (小有名氣)
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至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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WRKY轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控丹參酮生物合成的研究 負責(zé)人:申業(yè) 參與人:申業(yè), 吳志剛, 姚霞, 王亞君, 張夏楠, 蔣喜紅, 張利華 金額:58萬 申請時間:2011 學(xué)科代碼:中藥資源(H2801) 項目批準號:81173490 申請單位:中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 研究類型:基礎(chǔ)研究 關(guān)鍵詞:丹參;丹參酮生物合成;WRKY轉(zhuǎn)錄因子;表達調(diào)控 WRKY轉(zhuǎn)錄因子是植物最大轉(zhuǎn)錄因子家族之一,參與植物生長發(fā)育、代謝調(diào)控及生物和非生物脅迫的防御。我們前期工作- - 丹參深測序結(jié)果,表明WRKY轉(zhuǎn)錄因子參與丹參酮生物合成,在生物信息學(xué)和基因表達譜分析基礎(chǔ)上,RNA干擾轉(zhuǎn)化毛狀根,快速篩選出與丹參酮合成相關(guān)WRKY基因,且克隆到這兩個WRKY基因。本研究在此基礎(chǔ)上,采用實時定量PCR、Northern blotting、亞細胞定位等確定其時空表達模式;構(gòu)建過表達載體和RNA干擾表達載體分別轉(zhuǎn)化丹參或擬南芥,轉(zhuǎn)錄水平檢測丹參酮合成關(guān)鍵酶基因的表達譜,同時檢測脂溶性丹參酮含量的變化,以驗證WRKY轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控丹參酮生物合成;凝膠阻滯結(jié)合染色質(zhì)免疫沉淀分析WRKY與DNA的結(jié)合活性,酵母雙雜交結(jié)合免疫共沉淀分析WRKY互作蛋白,以確定WRKY轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控機制,進而闡明WRKY轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)控丹參酮生物合成中的功能和機制。 |
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