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[求助]
凝膠層析圖譜問題
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我是做蛋白質(zhì)純化的，第一次裝柱就跑凝膠，結(jié)果有3個(gè)氣泡，沒有發(fā)現(xiàn)，跑了一次后，出了2個(gè)峰。后來重新裝柱，結(jié)果發(fā)現(xiàn)少了一個(gè)峰，原來那個(gè)小峰的地方變成一個(gè)很小的突起。但是兩次上樣的量是一樣的。 我兩次出峰的時(shí)間都比較短，大約是走了0.5個(gè)柱子體積就出第一個(gè)峰，第二個(gè)峰大約是0.7-0.8個(gè)柱體積就出峰了。 而我的蛋白質(zhì)條帶大約在60KD以下的為主，用的是進(jìn)口的S-200 各位大俠覺得我是哪里出問題了？ 見2，3樓 [ Last edited by 1949stone on 2011-12-18 at 22:04 ] |
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 【分子生物】EPI帖 |
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2樓2011-12-17 01:31:33
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2011-12-17 19:54:38, 180.62 K
3樓2011-12-17 19:55:22
4樓2011-12-17 19:58:11
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5樓2011-12-18 14:32:22
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6樓2011-12-18 14:33:49
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因?yàn)槲业碾妷褐岛苄�，別人的大多在100以上 我的只有在1以下，所以很麻煩。我用+1至 -1 的范圍內(nèi)做色譜圖，結(jié)果峰不是很大，但時(shí)看不到這個(gè)右邊的小峰 只有到了你看到的這個(gè)范圍 才能看到那個(gè)小峰。 所以此時(shí)的基線變得很不穩(wěn)。 如果+10 至-1的范圍 基線就很直了��！我唯一想不通的是，柱子中有氣泡競(jìng)會(huì)多出了一個(gè)峰，難道有氣泡的分辯率會(huì)更好？ 還有一個(gè)更奇怪的，分子篩過完后，純化倍數(shù)下降了，酶與蛋白濃度的比值競(jìng)變小了？ |
7樓2011-12-18 20:45:30
8樓2011-12-18 20:48:13
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BIO-che9樓2011-12-19 15:01:19
10樓2011-12-20 00:14:25
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