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doudouxiong銅蟲 (小有名氣)
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DNA是我自己手提的,Marker最大的條帶是1500bp的,PCR后的產(chǎn)物檢測(cè)中沒有檢測(cè)到擴(kuò)增的條帶,總是檢測(cè)出類似于基因組的片段,引物是特異性的,目的是擴(kuò)增基因的一段,怎么會(huì)這樣呢? 注:引物的退火溫度是58.6,PCR擴(kuò)增的時(shí)候是55° |
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首先摸下梯度,如果梯度出了,你沒擴(kuò)出來那就是你模板的問題,如果摸梯度就什么都沒出可以考慮如下思路: 重新設(shè)計(jì)引物,考慮目的片段長(zhǎng)度換更適合的酶、 另外您說“注:引物的退火溫度是58.6,PCR擴(kuò)增的時(shí)候是55°”是啥意思? |
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