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冰凝東金蟲 (小有名氣)
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[求助]
pCAMBIA1205轉(zhuǎn)化問題,急急急急急……
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小弟研一,最近得到pCAMBIA1205的載體,進(jìn)行轉(zhuǎn)化是各種問題……請(qǐng)大俠們支招!! pCAMBIA1205 抗性是氯霉素,轉(zhuǎn)化用的大腸桿菌是DH5α……涂板子氯霉素濃度25μg/ml、50μg/ml、150μg/ml都試過,37℃倒置培養(yǎng)過夜,板子像花臉一樣,糊狀發(fā)白,有時(shí)候有很多很小的菌落,挑單克隆于加氯霉素的LB液體培養(yǎng)基中,37攝氏度220rpm振蕩培養(yǎng)過夜,菌液變渾濁,離心有菌,但是在提取質(zhì)粒的時(shí)候,加入S3懸浮液后無法離心,只能得到發(fā)白的渾濁液體,多次轉(zhuǎn)移離心后提取物最后檢測(cè)沒有東西…… 做過多次……幾近瘋掉!請(qǐng)各位大俠幫忙…… |
新蟲 (初入文壇)
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