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shiliu2011木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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什么是限制性?xún)?nèi)切核酸酶的星號(hào)活性? 已有5人參與
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什么是限制性?xún)?nèi)切核酸酶的星號(hào)活性?雙酶切選擇buffer時(shí),是應(yīng)該選沒(méi)有星號(hào)活性的效率較低的buffer OR 效率為100帶有星號(hào)活性的buffer?為什么? 本人是新手,還望各位高級(jí)別的蟲(chóng)子賜教!謝謝! |

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:Ⅱ類(lèi)限制酶雖然識(shí)別和切割的序列都具有特異性,但是這種特異性受特定條件的限制,即在一定環(huán)境條件下表現(xiàn)出來(lái)的特異性。條件的改變,限制酶的特異性就會(huì)松動(dòng),識(shí)別的序列和切割都有一些改變,改變后的活性通常稱(chēng)第二活性,而將這種因條件的改變會(huì)出現(xiàn)第二活性的酶的右上角加一個(gè)星號(hào)表示,因此第二活性又稱(chēng)為星 活性。 概括起來(lái),誘發(fā)星活性的因素有如下幾種: (1)高甘油含量(>5%, v/v); (2)限制性?xún)?nèi)切核酸酶用量過(guò)高(>100U/ugDNA); (3)低離子強(qiáng)度(<25 mmol/L); (4)高pH(8.0以上);(5)含有有機(jī)溶劑,如DMSO,乙醇等; (6)有非Mg2+的二價(jià)陽(yáng)離子存在(如Mn2+,Cu2+,C02+,Zn2+等 選用效率為100帶有星號(hào)活性的buffer, |
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