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求標(biāo)準(zhǔn)曲線中的問(wèn)題:
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下面是兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室作的標(biāo)準(zhǔn)曲線,為什么差異那么大,請(qǐng)給予解釋。 1、精密稱取在105℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品25 mg置50 ml量瓶中,加60%乙醇適量,微熱使溶解,放冷加60%乙醇稀釋至刻度,搖勻精密量取25 ml,置50 ml量瓶中,加60%乙醇稀釋至刻度,搖勻,即得(1 ml中含無(wú)水蘆丁0.25mg)。 精密量取對(duì)照品溶液0.0 ml、1.0 ml、2.0 ml、3.0 ml、4.0 ml、5.0 ml分別置25 ml量瓶中,各加水至5 ml,加5%亞硝酸鈉溶液1 ml,搖勻,放置6分鐘,加10%硝酸鋁1 ml,搖勻,放置6分鐘,加4 %氫氧化鈉溶液10 ml再加60%乙醇稀釋至刻度,搖勻,放置15分鐘。照分光光度法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅤA)試驗(yàn),在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,吸收度為縱坐標(biāo),以濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 其吸收值分別為: C A 0 0 0.01 0.126 0.02 0.211 0.03 0.331 0.04 0.451 0.05 0.563 2、精密稱取10 mg蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,用60 %乙醇溶解,定容至50 mL容量瓶中,得濃度為0.2 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液。準(zhǔn)確吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液0、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4 mL于10 mL容量瓶中,加入5 % NaNO2溶液0.4 mL,搖勻;放置6 min后,加入10 % Al(NO3)3溶液0.4 mL,搖勻;放置6 min后,加入4 % NaOH溶液4 mL,搖勻;最后用60 %乙醇定容至10 mL,15 min后于510 nm處測(cè)定吸光值。以蘆丁濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線, 其吸收值分別為: C A 0 0 0.016 0.384 0.024 0.578 0.032 0.772 0.040 0.967 0.048 1.161 問(wèn)題如題,請(qǐng)高手給予我指點(diǎn)迷津。 |
HPLC |
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