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[交流]
有人對(duì)293T細(xì)胞中的SV40大T抗原有研究么？
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| 如題，SV40是致癌的，大T抗原（LTA）在293T中的表達(dá)是否也有致癌性？ |
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leileihmr(金幣+1):謝謝參與
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293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系，293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生，同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原，含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動(dòng)子區(qū)的質(zhì)�？梢詮�(fù)制。用Ca3(PO4)2轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50%。蛋白表達(dá)水平高，轉(zhuǎn)染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測(cè)到表達(dá)的蛋白。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞是過表達(dá)蛋白并獲得細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。 形態(tài)特點(diǎn) 上皮細(xì)胞 致瘤性 + 產(chǎn)物或抗原 大T抗原 染色體核型 亞三倍體人細(xì)胞系。染色體眾數(shù)為64，30%的細(xì)胞有64 條染色體。4.2%的細(xì)胞染色體數(shù)目更多。多數(shù)細(xì)胞der(1)t(1;15) (q42;q13), der(19)t(3;19) (q12;q13), der(12)t(8;12) (q22;p13),還有四條標(biāo)記染色體，有的細(xì)胞另有5條標(biāo)記染色體。der(1)與M8 (or Xq+)常常成對(duì)出現(xiàn)。N17 與 N22各有四條。值得注意的是多數(shù)細(xì)胞有三條X染色體，兩條Xq+，一條Xp+。 生長(zhǎng)特性 粘附 文獻(xiàn)評(píng)價(jià) 293細(xì)胞系是原代人胚腎細(xì)胞轉(zhuǎn)染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化細(xì)胞。[RF32725] 表達(dá)轉(zhuǎn)染的腺病毒5的基因。[RF32725] 早期報(bào)道認(rèn)為此細(xì)胞含有Ad 5基因組左端和右端[RF32764]，現(xiàn)已清楚僅含有左端序列。[RF50113] 此細(xì)胞系人腺病毒滴度高。 室溫不貼壁，37℃幾日后重新貼壁。 表達(dá)由整合素beta-1 亞基與�；Y(jié)合素受體 alpha-v 亞基組成的玻基結(jié)合素細(xì)胞表面受體. [RF33793] The Ad5 insert was cloned and sequenced, and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2). 傳代 293:棄培養(yǎng)基，含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗滌，棄去，加1-2ml消化液室溫或37℃消化。 加入新鮮培養(yǎng)基，吸出，分到新培養(yǎng)皿中。一傳二至一傳四。 293T:生長(zhǎng)快，通常倍增時(shí)間不到一天 。每3~4 天1：10至1：20稀釋，5% CO2條件下培養(yǎng)。細(xì)胞貼壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶過度消化。 培養(yǎng)基更換 每2-3天一次 凍存液 95%培養(yǎng)基；5%,DMSO；culture medium 95%; DMSO, 5%； 培養(yǎng)條件 ATCC培養(yǎng)基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氫鈉，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸鈉；10%加熱滅活的馬血清 37℃培養(yǎng) |
3樓2012-02-02 12:50:01
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