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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 關于Ni-NTA純化蛋白
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rsgd1990銀蟲 (初入文壇)
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[交流]
關于Ni-NTA純化蛋白 已有7人參與
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我在實驗室純化一個蛋白，超聲波破碎菌體后離心，將上清液過柱子，bindbuffer 的咪唑為10mM,wash buffer 的咪唑為20mM和100mM,elutebuffer 的咪唑為250mM，ph都是8。最后蛋白沒有洗下來，還在柱子上。 于是我加大elutebuffer的咪唑濃度，變?yōu)?00mM,結果還是洗不下來。 老師就讓我降低ph試試，今天我把ph調到6.5，但還是不行，明天打算降到5.5試試。 各位有沒有遇到這種情況的？是不是ph的原因�。� |
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