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誘變難做啊
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| 我們實(shí)驗(yàn)室合成了一種植物源農(nóng)藥，可以防治枯萎病菌，導(dǎo)師目前讓我做的誘變尋找抗藥菌株，以便了解其殺菌機(jī)理，哎郁悶啊！該如何做啊，紫外誘變試過，實(shí)驗(yàn)室條件有限，光復(fù)活很明顯，目前是做硫酸二乙酯誘變，毫無頭緒啊，有人做過類似的實(shí)驗(yàn)不？求教， |
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10樓2012-02-23 00:07:50
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
uuu555000(金幣+13): 2012-02-22 20:10:24
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uuu555000(金幣+13): 2012-02-22 20:10:24
| 這種誘變的話建議物理誘變配合化學(xué)誘變，物理選紫外就可以，首先找到最大致死率的劑量，這個(gè)劑量包括的比較多，要反復(fù)優(yōu)化，比如照射時(shí)間，接受照射的菌體濃度，照射距離，建議晚上進(jìn)行，找個(gè)臺(tái)燈，換上紅色燈泡就可以，誘變完之后涂布平板記著要用黑色不透光布包起來，培養(yǎng)一段時(shí)間（根據(jù)菌體生長曲線確定）�；瘜W(xué)誘變樓主用的硫酸二乙酯誘變我用過，這種誘變劑毒性相對小一些，用的時(shí)候注意要將硫酸二乙酯與乙醇或丙酮混合（5:95就可以）作為誘變母液，不然不會(huì)和菌液混合，一般10ml10的六次方的菌液加0.5ml到1ml誘變母液就可以（這個(gè)需要樓主自己優(yōu)化誘變濃度），之后搖床培養(yǎng)一段時(shí)間（同樣需要優(yōu)化誘變時(shí)間）最后涂布之前別忘加終止劑硫代硫酸鈉（濃度忘了，樓主自己查一查把）加入與硫酸二抑制體積為1：1，之后可以涂布平板了。其實(shí)誘變過程相對比較簡單，難的是篩選，建議樓主可以采用推理選育來篩選，關(guān)于推理選育網(wǎng)上有很多文章，樓主可以自己查，另外，目前來說致死率在75%~85%之間的誘變是比較好的，既可以保證菌體數(shù)量，又可以保證較高的正突變率~~95%的致死率在正突變率上很難保證~~ |
5樓2012-02-22 12:35:22
4樓2012-02-22 11:40:21
2樓2012-02-22 08:58:57
3樓2012-02-22 10:51:11
6樓2012-02-22 16:05:36
7樓2012-02-22 18:26:20
8樓2012-02-22 19:06:31
9樓2012-02-22 20:05:38
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11樓2012-03-21 18:35:41
12樓2012-03-22 00:06:52
13樓2012-03-22 09:40:36
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14樓2012-03-22 09:59:23
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15樓2012-04-16 09:41:45
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16樓2012-04-16 09:43:46
17樓2012-04-16 13:55:02
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18樓2012-04-16 19:23:57
19樓2012-04-16 19:27:57
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20樓2012-04-17 19:23:48
21樓2012-04-17 20:29:14
22樓2012-04-17 22:37:04
23樓2015-06-19 10:54:43
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