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~春夢秋云~金蟲 (小有名氣)
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[求助]
ABA對擬南芥突變體發(fā)芽及生長的影響的試驗該如何設(shè)計？
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| 擬南芥突變體有若干種種子，ABA該如何處理，以及需要觀測什么指標呢？想知道比較全面的，在此先謝過！ |
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eagle00768
木蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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~春夢秋云~(金幣+2): ★★★★★最佳答案 2012-02-25 15:36:32
wanhscn(金幣+5, MolEPI+1): 根據(jù)樓主的反饋，回答很好，決定授予小木蟲分子生物版專家指數(shù)一枚，以鼓勵！ 2012-02-25 15:55:02
~春夢秋云~(金幣+2): ★★★★★最佳答案 2012-02-25 15:36:32
wanhscn(金幣+5, MolEPI+1): 根據(jù)樓主的反饋，回答很好，決定授予小木蟲分子生物版專家指數(shù)一枚，以鼓勵！ 2012-02-25 15:55:02
| 你可以用不同濃度梯度的ABA處理種子，對比相同濃度不同種子之間的萌發(fā)率，然后再看在哪個濃度下效果最好，這個可以先用對應(yīng)的野生型做一下，確定你最后要用哪幾個濃度。具體來說，就是找一些萌發(fā)小皿，就是一些塑料的小培養(yǎng)皿，假設(shè)你用5個ABA（包括ABA0，也就是對照）梯度，有5個樣（包括野生型和突變體），每個樣每個濃度至少做3個重復，那么就是75個小皿。小皿中鋪上濾紙，加入600微升的ABA處理液，鋪上種子，一般60粒左右。然后把這些小皿找個萌發(fā)盒放起來，就是帶有蓋子那種盒子。放在4度3d左右，然后放到人工培養(yǎng)箱大概5-7天拿出來數(shù)萌發(fā)率。這個就算是ABA處理對種子萌發(fā)的影響。至于對生長的影響，一般就是看小苗吧。先把種子鋪到MS培養(yǎng)基上，等到統(tǒng)一萌發(fā)以后（即在冰箱4度先放3d左右，然后放培養(yǎng)箱或者培養(yǎng)室里3、4d）把小苗移到含不同ABA濃度的MS培養(yǎng)基上，這時要用豎板子，再接著在培養(yǎng)室（或培養(yǎng)箱）培養(yǎng)約1w，期間要注意觀察差異，一般指標就是看地上部分和地下部分，也就是真葉的生長狀況，有沒有出現(xiàn)死亡，底下部分就是測量根長之類的。一般也就這些了吧，不知道這么說是否夠詳細清楚？ |
2樓2012-02-25 13:24:01
~春夢秋云~
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3樓2012-04-11 12:16:25
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