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淚流滿面請教各位大俠凝膠色譜中流動相加鹽的目的和原理
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本人凝膠色譜新手，在做一個項目，需要用凝膠色譜。美國藥典論壇上已有方法，重復了人家方法發(fā)現(xiàn)有些地方不對，撇開這些不談，先說說我的疑問吧！ 1 美國藥典上的流動相加了0.1M的硝酸鉀，我試了一針加的，一針不加的，發(fā)現(xiàn)不加鹽峰會前沿，加鹽的峰很對稱，請問在凝膠色譜里加鹽的目的除了改善峰形還有什么作用嗎？我更好奇的是鹽是通過什么原理來改善峰形的？ 2 還有一個很奇怪的現(xiàn)象，我的樣品和兩個雜質出峰時間重疊，即專屬性不合格，這三種物質雖然都是鈉鹽，但大家請注意樣品的分子量范圍是1000-2000，而兩個雜質的分子量一個是100多，一個是300多，就是說在分離原理為分子排阻的凝膠色譜里，分子量1000多的和100,300的一起出峰，改變流動相（換過純水，也試過加大有機相比例）變化并不明顯，這是為什么呢？難道現(xiàn)在的凝膠色譜已經(jīng)不是單純的分子排阻原理了，還是說樣品的出峰時間除了和分子量有關，還和他們的水溶性有關？ 3 還有一個現(xiàn)象我不能理解，就是走空白，也就是流動相的時候會出現(xiàn)一些溶劑峰，走樣品的時候也會出現(xiàn)溶劑峰，但是樣品中的溶劑峰的響應要比溶劑峰里的高多了，這是怎么回事呢？ 這幾個問題快把我折磨瘋了，請高手解答��！ [ Last edited by xiaoxin2809 on 2012-2-28 at 06:55 ] |
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