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薄層與硅膠柱層析的幾個(gè)問題 已有1人參與
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我想分離黃芪中的黃酮類物質(zhì),采用的是硅膠柱層析先砍斷粗粉。薄層選的展開劑時(shí)別人推薦的氯仿/甲醇。做了個(gè)6:1的,RF值分別為0.13,0.21,0.35,0.75。 1.我想用梯度洗脫,梯度開始的濃度是不是板上只有一個(gè)點(diǎn),RF值為0.2左右時(shí)的展開劑比例就可以作為淋洗劑的起始比例?也就是把RF值0.75壓到0.2時(shí)的比例。 2.我自己過了個(gè)小柱子試了試,柱子是2*20的,濕法裝柱,干法上樣1.3g。洗脫梯度為氯仿--氯仿:甲醇99:1---25:1---10:1--6:1,洗脫到25:1時(shí)還有分段,但到10:1時(shí)分段漸漸重合了。到6:1就好像一大灘沒分離的原樣品直接就下來了。而且柱子里的硅膠像被溶解了似的變得透明,到7:3時(shí)滴下的溶液就呈現(xiàn)渾濁現(xiàn)象了。所以我就終止了實(shí)驗(yàn)。。。 求解釋。。。。求解決。。。 |

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