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笑了樂新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助高效液相色譜全波長(zhǎng)掃描的問題
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| 我做高效液相,不知道波長(zhǎng),就做了個(gè)全波長(zhǎng)掃描,檢測(cè)器是2998PDA,流動(dòng)相是乙腈和水,梯度洗脫,自動(dòng)進(jìn)樣,我的藥品較少,只有0.5ml,結(jié)果出的峰很小,是我的樣品太少的原因啊,還是,我的洗脫相有問題,沒有洗脫下來?希望懂得人幫我 |


新蟲 (小有名氣)

木蟲 (著名寫手)

至尊木蟲 (著名寫手)
小木蟲的朋友
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首先,要搞清楚hplc的出峰原理,檢測(cè)器之所以能夠出峰,是因?yàn)槟骋晃锓N在該波長(zhǎng)處有吸收,而且該物質(zhì)在某一波長(zhǎng)處吸收越強(qiáng),出峰越明顯,因此你首先要做的是對(duì)你的化合物做一個(gè)“紫外-可見”吸收光譜,確定化合物的最大吸收波長(zhǎng)位置,然后將最大吸收波長(zhǎng)設(shè)為檢測(cè)波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè) 其次,混合物的分離和液相色譜的柱子也有關(guān)系,看你使用的是正相還是反相,結(jié)合柱子以及流動(dòng)相的極性,確認(rèn)如何能將所有的物種洗脫下來,當(dāng)然,如果使用TCL點(diǎn)板能顯色(或者碘熏,或者其它顯色劑)的話也能大概確定里面有幾個(gè)化合物種類 |

金蟲 (職業(yè)作家)
木蟲 (著名寫手)
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