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maomao1426木蟲 (著名寫手)
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[求助]
放線菌液體培養(yǎng)基
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想要獲得大量放線菌細(xì)胞，請(qǐng)問用什么培養(yǎng)基較好？ 附：現(xiàn)在我用的高氏一號(hào)液培，長(zhǎng)得不好。 |
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 放線菌 |
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yanglong0321
新蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 放線菌要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化才能長(zhǎng)得比較好。除了高氏一號(hào)培養(yǎng)基配方中的無機(jī)鹽及微量元素不變外，一般要調(diào)節(jié)碳源和氮源，碳源除了加可溶性淀粉外，還可以適當(dāng)添加葡萄糖，氮源除了無機(jī)氮源外，還要適當(dāng)添加有機(jī)氮源，之前做實(shí)驗(yàn)用的是安琪公司的有機(jī)氮源酵母浸粉，通過這些優(yōu)化，效果比原始的高氏一號(hào)培養(yǎng)基菌體長(zhǎng)得很好。 |
4樓2012-03-08 10:26:30
張香玲1017
鐵桿木蟲 (著名寫手)
冷夜雨
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2樓2012-03-08 09:33:25
3樓2012-03-08 10:12:42
mada1986
木蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
maomao1426: 金幣+3, ★有幫助 2012-06-20 09:40:46
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
maomao1426: 金幣+3, ★有幫助 2012-06-20 09:40:46
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我這有幾個(gè)培養(yǎng)基你可以試試看 給你附在下面了 祝實(shí)驗(yàn)順利 MS瓊脂培養(yǎng)基（g/L） 甘露醇 20 黃豆粉 20 瓊脂粉 20 pH 自然 先將甘露醇溶解于適量水中，再加入到含有相應(yīng)量瓊脂和黃豆粉的三角瓶?jī)?nèi)，115℃，15min滅菌2次，兩次之間振蕩瓶子。 微量元素溶液（10×）（mg/100 ml）： ZnCl2 40 Na2B4O7•10H2O 10 FeCl3•6H2O 200 (NH4)6Mo7O24•4H2O 10 CuCl2•2H2O 10 MnCl2•4H2O 10 高氏１號(hào)（G 1）培養(yǎng)基（g/L）： 可溶性淀粉 20 NaCl 0.5 K2HPO4 0.5 KNO3 1.0 MgSO4•7H2O 0.5 FeSO4 0.01 純化瓊脂粉 20 pH 7.4 R2YE培養(yǎng)基（g / L）： 蔗糖 103 K2SO4 0.25 MgCl2•6H2O 10.12 葡萄糖 10 Difco酪蛋白氨基酸 0.1 TES 5.73 微量元素溶液（10×） 2 ml 酵母抽提物 5 稱取2.02克純化瓊脂放入250 ml三角瓶中，倒入80 ml上述溶液，塞上棉塞后高壓滅菌。使用時(shí)，將培養(yǎng)基融化，然后在每瓶中加入以下滅菌溶液： KH2PO4（0.5%） 1 ml NaOH（1mol/L） 0.7 ml CaCl2（5 mol/L） 0.4 ml 軟瓊脂培養(yǎng)基：同R2YE培養(yǎng)基，但瓊脂粉含量為0.6％。 酵母、麥芽抽提物、葡萄糖（YMB）培養(yǎng)基（g/L）： 酵母抽提物 4 葡萄糖 4 麥芽抽提物 10 微量元素溶液（10×） 200ml pH 7.2 YMA培養(yǎng)基：在YMB培養(yǎng)基中加入純化瓊脂2 % YMA軟瓊脂培養(yǎng)基：在YMB培養(yǎng)基中加入純化瓊脂0.6 % YEME液體培養(yǎng)基（g /L）： 酵母抽提物 3 Polypepton 5 麥芽抽提物 3 葡萄糖 10 蔗糖 250 pH 自然 產(chǎn)孢培養(yǎng)基YMS（g/L） 酵母抽提物 1.5 可溶性淀粉 10.0 KNO3 1.0 瓊脂粉 16 pH 7.2 P（原生質(zhì)體制備）緩沖液（g/L） 蔗糖 103 K2SO4 0.25 MgCl2•6H2O 2.02 微量元素溶液 2 ml 先加水定容至800ml，分裝成80 ml的等分樣品，然后高壓滅菌。 使用前，每瓶加入以下無菌組分： KH2PO4（0.5%） 1 ml TES（5.73%，pH 6.5） 10 ml CaCl2•2H2O（3.68%） 10 ml 液體培養(yǎng)的時(shí)候 不要加瓊脂就行了 |
5樓2012-03-08 12:13:47
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